基因工(gōng)程技術作(zuò)爲現(xiàn)代生物科學技術的核心,被廣泛應用(yòng)于工(gōng)業、環境、能(néng)源、醫(yī)藥以及農(nóng)牧業等領域。其關鍵技術是DNA的連接和(hé)重組,而在此過程中發揮重要作(zuò)用(yòng)的就是核酸工(gōng)具酶。
核酸工(gōng)具酶種類繁多、功能(néng)各異,主要包括限制酶、聚合酶、連接酶、修飾酶和(hé)核酸酶等。這(zhè)些(xiē)酶具有特異性的序列識别能(néng)力以及高(gāo)效的催化活性,在一定的條件下(xià)可以對(duì)核酸進行切割、連接、擴增及修飾等,反應條件溫和(hé)且具有出色的生物相容性,因此,被廣泛地應用(yòng)于核酸、蛋白(bái)質和(hé)小(xiǎo)分子等生物活性分子的分析檢測。
具體的各種酶的功能(néng),大(dà)家應該都比較清楚(不清楚的請(qǐng)去留言),這(zhè)裏不過多贅述,我們聊聊大(dà)家比較關心的問題——酶能(néng)不能(néng)達到(dào)預期效果。别人的不清楚,我們普健自(zì)産的幾個核酸工(gōng)具酶,效果還是不錯的。
核酸工(gōng)具酶
重點推薦
AtaGenix 全能(néng)核酸酶
Benzonase Nuclease全能(néng)核酸酶,是一種經過基因工(gōng)程改造的核酸内切酶。它能(néng)夠在非常廣泛的條件下(xià)(6 M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解所有形式的(雙鏈、單鏈、線狀、環狀或超螺旋形式)DNA和(hé)RNA。全能(néng)核酸酶不特異性識别堿基序列,可在鏈内任意核苷酸間進行切割,廣泛用(yòng)于去除生物制品中的核酸。
産品優勢
經長期項目檢驗,純化中可有效降低(dī)蛋白(bái)樣品粘度,去除蛋白(bái)樣品中核酸的污染。
試劑兼容性高(gāo),可用(yòng)于去除細胞、病毒等實驗中的核酸,也(yě)可用(yòng)于去除生化分析樣品中的核酸。
高(gāo)效的核酸消化能(néng)力,酶活>800U/μL,比活>1.0×106U/mg,降解所有形式的DNA和(hé)RNA。
嚴格質控,每個批次産品均經過活性和(hé)功能(néng)驗證,保證産品質量。
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AtaGenix Benzonase Nuclease全能(néng)核酸酶
Taq DNA Polymerase
Taq DNA聚合酶具有5'→3'DNA聚合酶和(hé)微弱的5'→3'核酸外(wài)切酶的能(néng)力,但(dàn)沒有3'→5'外(wài)切酶的能(néng)力,這(zhè)意味着在3'末端會(huì)出現(xiàn)一個dA突出。利用(yòng)該特性,它可被用(yòng)于TA克隆。
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
末端脫氧核糖核酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT),是一種模闆依賴的 DNA 聚合酶,可以催化在寡核苷酸、單鏈或雙鏈DNA的 3’羟基端加上(shàng)dNTP,最短可催化3個核苷酸長度的寡核苷酸。
我們還有另一類工(gōng)具酶
蛋白(bái)工(gōng)具酶
這(zhè)類蛋白(bái)研究工(gōng)具酶是由普健生物經過基因工(gōng)程改造和(hé)純化後的重組蛋白(bái)酶,具有識别特異性氨基酸序列位點,并将對(duì)應蛋白(bái)标簽切割下(xià)來(lái)的作(zuò)用(yòng)。
IdeS Protease
産品優勢
IdeS具有獨特的底物選擇性,高(gāo)度特異性的IgG切割,快(kuài)速生成高(gāo)純度的片段,可以作(zuò)爲工(gōng)具酶應用(yòng)于抗體類藥物或抗體融合蛋白(bái)藥物的結構表征分析。
高(gāo)純度:可溶性高(gāo)效表達,宿主蛋白(bái)殘留低(dī),純度>95%;
高(gāo)穩定性:嚴格質控,每批産品均經過活性和(hé)功能(néng)驗證,保證産品質量;
高(gāo)酶活:酶活>20U/ul,可以特異性的酶切IgG抗體獲得所要的抗體片段;
無動物源性:重組表達,全程未使用(yòng)任何動物源原料,無外(wài)源性病毒污染。
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IdeS Protease——特異性切割IgG,一個挑剔的工(gōng)具酶
TEV Protease
高(gāo)活性、高(gāo)特異性,去标簽首選
TEV蛋白(bái)酶(重組型)是經基因工(gōng)程改造後的重組蛋白(bái)酶,可特異性識别Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly七氨基酸序列,它與腸激酶 、凝血酶、Factor Xa、SUMO等蛋白(bái)酶相比,具有高(gāo)活性和(hé)高(gāo)特異性的雙重特點,已成爲融合蛋白(bái)表達後去除标簽的首選蛋白(bái)酶。
rb-EK
高(gāo)專一性、高(gāo)效酶切、比活性高(gāo)
重組牛腸激酶(rb-EK)是一種絲氨酸蛋白(bái)水(shuǐ)解酶,能(néng)高(gāo)效專一地識别蛋白(bái)質中Asp-Asp-Asp-Asp-Lys(DDDDK)序列,并在賴氨酸(Lys,K)的C端水(shuǐ)解肽鍵,産生切割,在生物體内水(shuǐ)解胰蛋白(bái)酶原轉變爲胰蛋白(bái)酶。由于腸激酶具有高(gāo)度專一性和(hé)高(gāo)效酶切特性,廣泛地應用(yòng)于基因工(gōng)程産品的開(kāi)發。天然腸激酶由1條115 kDa的重鏈和(hé)1 條35 kDa的輕鏈組成,重鏈起錨定細胞膜的作(zuò)用(yòng),輕鏈具有全酶完整的催化活性。普健生物表達的牛腸激酶輕鏈活性核心區(qū)域,比活性更高(gāo),特别适用(yòng)于基因工(gōng)程融合蛋白(bái)的酶切。
PNGase F
PNGase F(肽N-糖苷酶F)是一種酰胺水(shuǐ)解酶,主要由腦(nǎo)膜炎膿杆菌等革蘭氏陰性菌分泌。PNGase F可以裂解由天冬酰胺連接的高(gāo)甘露糖及雜(zá)合和(hé)複雜(zá)的寡糖糖蛋白(bái)。PNGase F的切割位點爲糖蛋白(bái)内側N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和(hé)天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵,同時(shí)将酶解後蛋白(bái)上(shàng)的天冬氨酰轉化爲天冬氨酸。PNGase F不會(huì)去除常見植物糖蛋白(bái)上(shàng)含有核心α-(1,3)- 岩藻糖連接的寡糖。
3C Protease
3C蛋白(bái)酶是切割小(xiǎo)RNA病毒科非結構蛋白(bái)的關鍵酶,在病毒複制過程中發揮着重要作(zuò)用(yòng)。人鼻病毒3C蛋白(bái)酶具有高(gāo)度的酶切特異性,能(néng)特異切割位于Gln-Gly之間的肽鍵,識别位點爲 Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro。普健生物将人鼻病毒3C蛋白(bái)酶的編碼區(qū)基因在大(dà)腸杆菌中進行表達,純化後獲得了(le)高(gāo)純度的重組3C蛋白(bái)酶,該蛋白(bái)酶能(néng)特異切割含有3C酶切位點的融合蛋白(bái),具有良好(hǎo)的生物學活性。同時(shí),普健生物自(zì)産的3C蛋白(bái)酶融合有GST标簽蛋白(bái),有利于後期将其從(cóng)酶切體系中去除。
SUMO Protease
SUMO蛋白(bái)酶識别完整的含100個氨基酸的SUMO(Small Ubiquitin-like Modifier)标簽蛋白(bái),并能(néng)高(gāo)效地把SUMO從(cóng)融合蛋白(bái)上(shàng)切割下(xià)來(lái)。與EK和(hé)TEV等蛋白(bái)酶的識别位點相比,由于其識别序列長,所以SUMO蛋白(bái)酶酶切反應有很(hěn)高(gāo)的特異性,且在較寬範圍的反應環境體系中保持較高(gāo)的活力,例如溫度(4-37℃)等。SUMO蛋白(bái)酶還具有多聚His标簽,便于使用(yòng)親和(hé)層析的方法,去除SUMO蛋白(bái)酶,純化目的蛋白(bái)。本産品經驗證在 TBS pH 8.0 和(hé) PBS pH 7.5 反應體系中均可使用(yòng)。
AtaGenix現(xiàn)有工(gōng)具酶
貨号 |
工(gōng)具酶 |
ATE00001 |
TEV Protease |
ATE00002 |
rb-EK |
ATE00003 |
3C Protease |
ATE00004 |
SUMO Protease |
ATE00005 |
PNGase F |
ATE00006 |
Taq DNA Polymerase |
ATE00008 |
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase |
ATE00009 |
Benzonase Nuclease |
ATE00010 |
IdeS Protease |