昆蟲杆狀病毒表達系統 (BEVS) 是一種利用(yòng)杆狀病毒作(zuò)爲外(wài)源基因的載體,通過感染昆蟲細胞或者昆蟲幼蟲來(lái)表達外(wài)源蛋白(bái)的系統,是重要的真核表達系統之一。
1.昆蟲杆狀病毒表達系統的優勢:
a.杆狀病毒安全性好(hǎo)
b.攜帶外(wài)源基因的容量大(dà)
c.外(wài)源目的蛋白(bái)質表達水(shuǐ)平高(gāo)
d.表達的真核基因産品可以進行正确的折疊與修飾,因而具有良好(hǎo)的生物活性。
2.與哺乳細胞相比昆蟲表達系統的優勢:
a.培養條件相對(duì)簡單,不需要CO2
b.不容易被細菌污染
c.能(néng)進行蛋白(bái)翻譯後糖基化修飾
d.大(dà)規模生産條件簡單,更易獲得大(dà)量蛋白(bái)
常見的表達載體及特征
載體 | 特征 |
pFastBac1 |
用(yòng)于高(gāo)水(shuǐ)平蛋白(bái)表達的強AcMNPV多角體基因 (PH)啓動子 用(yòng)于簡化克隆的大(dà)型多克隆站(zhàn)點 |
pFastBacHT |
用(yòng)于高(gāo)水(shuǐ)平蛋白(bái)表達的強多角體(PH)啓動子 用(yòng)于使用(yòng)金(jīn)屬螯合樹脂純化重組融合蛋白(bái)的N端6His标簽,以及用(yòng)于在蛋白(bái)純化後去除6His标簽的TEV蛋白(bái)酶裂解位點 用(yòng)于簡化克隆的三個讀碼框的載體 |
pFastBacDual |
用(yòng)于同時(shí)表達兩種蛋白(bái)的兩個強杆狀病毒啓動子(PH 和(hé) p10) 用(yòng)于簡化克隆的兩個大(dà)型多克隆位點 |
常見的表達細胞及特征
細胞 | 來(lái)源 | 用(yòng)途 |
Sf9 | Sf9細胞系克隆分IPLBSF21-AE(Sf21),來(lái)源于秋蠅蠕蟲(草地夜蛾)蛹的卵巢組織 |
适于轉染、純化、生産高(gāo)滴度病毒、鋪闆以及表達重組蛋白(bái) |
Sf21 |
Sf21細胞衍生于IPLBSF-21細胞系,也(yě)來(lái)源于秋蠅蠕蟲(草地夜蛾)蛹的卵巢組織 |
也(yě)适于轉染、純化、生産高(gāo)滴度病毒、鋪闆以及表達重組蛋白(bái)。在一些(xiē)結構上(shàng)Sf21細胞可能(néng)比Sf9細胞表達蛋白(bái)量高(gāo) |
Hi5 |
Hi5細胞系源于博伊斯湯普森研究所對(duì)植物的研究和(hé)源于白(bái)菜尺蠖卵巢細胞,粉紋夜蛾細胞 |
Hi5細胞表達重組病毒性能(néng)優越, 經常用(yòng)于轉染和(hé)空(kōng)斑純化,也(yě)适用(yòng)于表達分泌型重組蛋白(bái) |
S2 |
S2是一種果蠅晚期胚胎細胞。其中多爲雌性四倍體細胞,也(yě)有雙倍體細胞 |
比較适合重組蛋白(bái)的表達 |