普健生物提供的分子間相互作(zuò)用(yòng)服務基于BiacoreTM、openSPR兩大(dà)系統,其原理(lǐ)是基于表面等離子體共振 (SPR)技術,能(néng)夠快(kuài)速實現(xiàn)對(duì)分子間(蛋白(bái)與蛋白(bái)、抗原與抗體、蛋白(bái)與小(xiǎo)分子)親和(hé)力的定性以及定量分析。與傳統的GST pull down,免疫共沉澱等相比,具有更高(gāo)的靈敏度、檢測通量及較低(dī)的樣品要求等優點。
表面等離子體共振 (SPR)親和(hé)力測定是一種基于光學的無标記檢測技術,用(yòng)于實時(shí)檢測兩個或多個分子之間的分子互作(zuò)。SPR親和(hé)力檢測是一種通過傳感器芯片跟蹤信号變化來(lái)檢測分子相互作(zuò)用(yòng)的方法。SPR信号通過折射率變化呈現(xiàn),它指的是響應單位 (RU) 大(dà)約相當于1pg/mm2的蛋白(bái)質表面濃度。在兩個分子之間的相互作(zuò)用(yòng)過程中,随時(shí)間繪制SPR信号會(huì)産生傳感圖,該圖可以實時(shí)可視(shì)(圖 1)。一般結合反應包括三個階段:結合、平衡和(hé)解離;将這(zhè)些(xiē)傳感圖數據與數學模型拟合,科學家們可以計(jì)算(suàn)關聯 (Ka) 和(hé)解離 (Kd) 速率常數,并最終确定結合親和(hé)力(KD)。與基于平衡點測量抗體結合親和(hé)力的等溫量熱法 (ITC) 不同,SPR可以獲得完整的動力學參數來(lái)評估結合和(hé)解離的所有影響以及抗體親和(hé)力。