1.載體構建
(1)可将cDNA克隆至客戶或者普健生物提供的哺乳細胞的表達載體中
(2)可在表達載體中添加分泌信号肽和(hé)純化标簽,促進蛋白(bái)分泌表達及滿足一步親和(hé)純化的需求
(3)能(néng)生産并鑒定高(gāo)效穩定細胞系,适合大(dà)規模發酵生産
2.穩定基因表達符合長期生産需求,整個實驗操作(zuò)流程提供長期穩定及規模可調的蛋白(bái)生産
3.瞬時(shí)表達(TGE)
(1)與穩定基因表達相比,TGE主要适用(yòng)于短期内制備重組蛋白(bái),一般在10天内即可快(kuài)速轉染,無需質粒DNA的遺傳性選擇
(2)普健生物的瞬時(shí)表達使用(yòng)懸浮細胞,能(néng)夠完成毫升到(dào)100L的體積的蛋白(bái)表達
4.工(gōng)藝過程開(kāi)發及擴大(dà)規模。普健生物能(néng)夠優化表達過程以及表達産物,預測細胞表達量,摸索發酵罐發酵條件,适合大(dà)規模發酵生産
5.純化:普健生物擁有完善的蛋白(bái)純化系統,親和(hé)純化,凝膠過濾,離子交換及疏水(shuǐ)層析等純化方法,能(néng)夠完成各類型蛋白(bái)的純化,以及純化工(gōng)藝的摸索
普健生物提供表達載體構建、瞬時(shí)轉染、表達測試及大(dà)規模動物細胞發酵和(hé)蛋白(bái)純化等一站(zhàn)式蛋白(bái)技術服務。
表達方式 |
細胞 |
瞬時(shí)表達 |
HEK293,HEK293細胞來(lái)源于293細胞系,采用(yòng)無血清懸浮培養CHO-S,CHO-S細胞是來(lái)自(zì)中國倉鼠卵巢細胞的克隆分離株,被馴化爲無血清懸浮培養 |
穩定表達 |
CHO-K1,CHO-K1由CHO衍生而來(lái),該細胞株培養條件簡單、貼壁強度适中,比較容易轉染 |
穩定細胞株構建 |
DG44,DG44 細胞(二氫葉酸還原酶缺陷型 , DHFR-)由中國倉鼠卵巢(CHO)細胞衍生而來(lái),常用(yòng)于構建适合重組蛋白(bái)生産的細胞系。DG44細胞篩選和(hé)共擴增标記是DHFR基因(dhfr) |
表達載體:pcDNA3.1, pIRES, pTT3, pCEP4,pATX1等