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大(dà)腸杆菌表達系統具有遺傳背景清晰，培養周期短，易于放(fàng)大(dà)生産，抗污染能(néng)力強等諸多優點，是目前應用(yòng)最爲廣泛的表達系統之一。普健生物經過十多年的打磨，建立了(le)3H(High through、High efficiency、High quality) 大(dà)腸杆菌表達系統，平台的表達成功率大(dà)于95%;獨有的表達純化以及複性平台，已成功交付上(shàng)萬例大(dà)腸杆菌表達服務項目。
大(dà)腸杆菌表達系統具有遺傳背景清晰，培養周期短，易于放(fàng)大(dà)生産，抗污染能(néng)力強等諸多優點，是目前應用(yòng)最爲廣泛的表達系統之一。普健生物經過十多年的打磨，建立了(le)3H(High through、High efficiency、High quality) 大(dà)腸杆菌表達系統，平台的表達成功率大(dà)于95%;獨有的表達純化以及複性平台，已成功交付上(shàng)萬例大(dà)腸杆菌表達服務項目。
1. 普健生物具有十幾年的蛋白(bái)表達經驗，15台中大(dà)型微生物培養搖床及發酵設備、12台超聲破碎儀、中試型高(gāo)壓均質儀等配套設備，可以實現(xiàn)高(gāo)通量，大(dà)規模大(dà)腸杆菌表達生産
2. 具有多種大(dà)腸杆菌表達載體pET系列、pGEX系列等;多種表達宿主：标準表達菌株、可增強蛋白(bái)表達的菌株T7E、表達毒性蛋白(bái)的C41、增強蛋白(bái)可溶性表達的超低(dī)溫菌株Arctic、以及其它經過AtaGenix優化改造的菌株;通過不同載體和(hé)菌株的優化組合，可以實現(xiàn)蛋白(bái)的高(gāo)效表達，蛋白(bái)表達成功率超過95%
3. 普健生物具有完善的大(dà)腸杆菌表達、純化、内毒素控制生産線，可以生産高(gāo)質量蛋白(bái)，用(yòng)于細胞活性實驗，動物實驗等，滿足高(gāo)質量的蛋白(bái)使用(yòng)需求
服務流程
大(dà)腸杆菌表達蛋白(bái)A
1.表達體系優化：包括宿主菌、誘導溫度、誘導時(shí)間、誘導劑的濃度及培養基。
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宿主菌 |
誘導溫度 |
誘導時(shí)間 |
誘導劑 |
培養基 |
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T7E,BL21,C41,Arctic |
30℃/37℃ |
1h/4h |
IPTG |
LB/自(zì)誘導培養基 |
蛋白(bái)A的搖瓶表達量爲8 mg/L, 随後進行了(le)發酵條件的優化，包括培養基成分的優化、分批及補料的測試，70 L 分批發酵的表達量爲60 mg/L。
2.3C酶去除蛋白(bái)MAT标簽，具體結果如圖3、圖4所示
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