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哺乳動物細胞表達系統

服務簡介

1.載體構建

(1)可将cDNA克隆至客戶或者普健生物提供的哺乳細胞的表達載體中

(2)可在表達載體中添加分泌信号肽和(hé)純化标簽,促進蛋白(bái)分泌表達及滿足一步親和(hé)純化的需求

(3)能(néng)生産并鑒定高(gāo)效穩定細胞系,适合大(dà)規模發酵生産

2.穩定基因表達符合長期生産需求,整個實驗操作(zuò)流程提供長期穩定及規模可調的蛋白(bái)生産

3.瞬時(shí)表達(TGE)

(1)與穩定基因表達相比,TGE主要适用(yòng)于短期内制備重組蛋白(bái),一般在10天内即可快(kuài)速轉染,無需質粒DNA的遺傳性選擇

(2)普健生物的瞬時(shí)表達使用(yòng)懸浮細胞,能(néng)夠完成毫升到(dào)100L的體積的蛋白(bái)表達

4.工(gōng)藝過程開(kāi)發及擴大(dà)規模。普健生物能(néng)夠優化表達過程以及表達産物,預測細胞表達量,摸索發酵罐發酵條件,适合大(dà)規模發酵生産

5.純化:普健生物擁有完善的蛋白(bái)純化系統,親和(hé)純化,凝膠過濾,離子交換及疏水(shuǐ)層析等純化方法,能(néng)夠完成各類型蛋白(bái)的純化,以及純化工(gōng)藝的摸索

普健生物提供表達載體構建、瞬時(shí)轉染、表達測試及大(dà)規模動物細胞發酵和(hé)蛋白(bái)純化等一站(zhàn)式蛋白(bái)技術服務。

表達方式

細胞

瞬時(shí)表達

HEK293,HEK293細胞來(lái)源于293細胞系,采用(yòng)無血清懸浮培養CHO-S,CHO-S細胞是來(lái)自(zì)中國倉鼠卵巢細胞的克隆分離株,被馴化爲無血清懸浮培養

穩定表達

CHO-K1,CHO-K1由CHO衍生而來(lái),該細胞株培養條件簡單、貼壁強度适中,比較容易轉染

穩定細胞株構建

DG44,DG44 細胞(二氫葉酸還原酶缺陷型 , DHFR-)由中國倉鼠卵巢(CHO)細胞衍生而來(lái),常用(yòng)于構建适合重組蛋白(bái)生産的細胞系。DG44細胞篩選和(hé)共擴增标記是DHFR基因(dhfr)

    表達載體:pcDNA3.1, pIRES, pTT3, pCEP4,pATX1等

服務優勢

經驗豐富:團隊具有十多年豐富的蛋白(bái)表達經驗,累計(jì)完成5000+哺乳表達項目,200+穩轉細胞株構建項目

可提供多種表達服務: 瞬時(shí)轉染表達,重組抗體表達生産,穩定細胞株構建服務

1.瞬時(shí)轉染表達:無血清懸浮培養的多種哺乳細胞表達系統,自(zì)主研發高(gāo)産表達體系,大(dà)幅度提高(gāo)表達量(3-6倍),同時(shí)提供商業化轉染體系爲廣大(dà)客戶提供多種選擇

2.重組抗體表達:擁有一套經過反複驗證的載體-細胞-轉染高(gāo)效表達體系,輕松獲得抗體的穩定性克級生産

3.穩定細胞株構建:擁有的自(zì)主知(zhī)識産權的CHO-K1改造細胞系可提供蛋白(bái)及抗體藥物研發生産服務

4.十萬級潔淨細胞房:可提供<0.1EU/ml級别的低(dī)内毒蛋白(bái)表達服務/産品

5.大(dà)規模生産:無血清懸浮細胞培養每批次200L+生産

6.一站(zhàn)式服務:基因優化、蛋白(bái)結構分析與表達方案設計(jì),瞬時(shí)轉染,穩定細胞株構建,重組抗體生産、數據分析

服務内容

服務項目

客戶提供

服務内容

服務周期

交付内容

哺乳動物細胞表達系統

基因序列

載體

基因合成

2-3周

基因合成報(bào)告

表達及純化測試

2周

提供表達及純化測試報(bào)告

1L表達及純化

2周

提供蛋白(bái)樣品及報(bào)告

搖瓶或發酵罐放(fàng)大(dà)

2-4周

提供蛋白(bái)樣品及報(bào)告

案例展示

HEK293細胞瞬轉表達病毒跨膜糖蛋白(bái)RG