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蛋白(bái)表達的重要性我們就不在這(zhè)裏一一贅述了(le)，就我們所知(zhī)的抗體其實也(yě)是蛋白(bái)之一，所以，做好(hǎo)蛋白(bái)就标志着我們能(néng)否做好(hǎo)各種蛋白(bái)抗體産品。蛋白(bái)生産的過程其實不困難，其實就是将需要表達的片段添加到(dào)DNA中，成成nRNA，然後表達出需要的蛋白(bái)産品。說起來(lái)簡單，但(dàn)是做起來(lái)非常的困難。下(xià)面，普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊蛋白(bái)的表達過程。
蛋白(bái)的合成過程看(kàn)起來(lái)并不困難，其實就是從(cóng)DNA到(dào)mRNA，表達出來(lái)，就是蛋白(bái)了(le)。
一般的操作(zuò)流程如下(xià)：
1、克隆或合成目的基因
2、構建載體
3、蛋白(bái)表達、純化及檢驗
4、大(dà)量表達
表達系統操作(zuò)的詳細步驟和(hé)所需時(shí)間：
1、基因合成及密碼子優化(一般需要耗時(shí)1-2周);
2、載體構建。我們需要将目标DNA克隆至表達載體上(shàng)，然後對(duì)質粒進行測序，測序合格後，再進行大(dà)量質粒的制備(一般這(zhè)個過程需要持續1-2周);
3、瞬時(shí)表達評估。主要進行瞬時(shí)表達及表達水(shuǐ)平檢測(通常需要耗時(shí)2周);
4、穩定細胞株開(kāi)發。主要進行細胞的穩定轉染及篩選，MTX擴增及篩選，細胞建庫等工(gōng)作(zuò)(一般來(lái)說需要耗時(shí)12-20周);
5、大(dà)量表達。在如上(shàng)的過程正常實現(xiàn)後，将細胞投入大(dà)量生産，并對(duì)其進行純化工(gōng)作(zuò)(一般耗時(shí)2-3周);
總的說來(lái)，蛋白(bái)表達的過程其實并不顯得特别的困難，相比單克隆抗體的制備過程來(lái)說，也(yě)不那麽繁瑣，但(dàn)是，如果不注意相應的細節問題，依然容易出現(xiàn)失敗的情況。所以，在日常制備單邊的過程中，我們需要注意到(dào)一些(xiē)細節方面的問題。普健生物爲您提供專業的蛋白(bái)制備服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
