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在蛋白(bái)制備的過程中，我們常常會(huì)利用(yòng)一些(xiē)方法來(lái)判斷蛋白(bái)的性能(néng)，比如SPR(分子間相互作(zuò)用(yòng)力分析)，就能(néng)夠很(hěn)好(hǎo)地爲之後蛋白(bái)制備提供數據支持。随着技術的不斷進步，各種各樣的方法也(yě)營運而生。今天，普健生物就在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家盤點常用(yòng)的幾種蛋白(bái)互作(zuò)技術及其優缺點。
1、免疫共沉澱技術
免疫共沉澱(Co-lmmunoprecipitation,COIP)技術其實就是利用(yòng)抗原與抗體之間的特異性結合原理(lǐ)而成。主要是通過在細胞裂解液之中添加特異性抗體，而後再通過靜置等一系列的手段讓其沉澱。而後再通過質譜法來(lái)檢測抗原的結合蛋白(bái)成員;
免疫共沉澱技術的優點是其過程更加符合體内真是生理(lǐ)情況，而且實驗條件溫和(hé)，不會(huì)出現(xiàn)人爲影響的情況;缺點也(yě)非常明(míng)顯，對(duì)于那些(xiē)結合力弱或者會(huì)瞬間結合的蛋白(bái)來(lái)說，研究起來(lái)就相對(duì)困難一些(xiē);
2、Pull Down技術
Pull Down技術則是通過先谷底固化或已經标記過的蛋白(bái)或标簽蛋白(bái)從(cóng)裂解液中特異性結合出其中的蛋白(bái)的方式。這(zhè)個方式也(yě)是利用(yòng)分子間相互作(zuò)用(yòng)的方式，但(dàn)是和(hé)COIP技術不同，它需要先把誘導蛋白(bái)純化出來(lái)後，才能(néng)與目的蛋白(bái)溶液進行孵化，無法自(zì)行模拟細胞内的天然環境;
3、雙分子熒光互補技術
雙分子熒光互補技術其實就是通過熒光蛋白(bái)多肽鏈上(shàng)進行操作(zuò)，在其末端新增兩個多肽片段，然後将其分别連接到(dào)能(néng)發生作(zuò)用(yòng)的目标蛋白(bái)上(shàng)。以爲你(nǐ)目标蛋白(bái)發生反應，且含有熒光蛋白(bái)，就能(néng)夠讓其産生熒光。這(zhè)個技術最大(dà)的優點就是讓其實現(xiàn)了(le)可視(shì)化，不過操作(zuò)相對(duì)要複雜(zá)一些(xiē);
4、酵母雙雜(zá)交技術
酵母雙雜(zá)交技術可以說是現(xiàn)階段使用(yòng)最爲廣泛的一項技術了(le)，也(yě)是現(xiàn)階段最重要的方法之一。其通過将靶蛋白(bái)和(hé)誘餌蛋白(bái)特異性結合後，因爲誘導蛋白(bái)結合了(le)基因的啓動子，将其置于酵母細胞内進行表達，如果能(néng)檢測到(dào)基因表達的産物則說明(míng)雙方有相互作(zuò)用(yòng)，反之則表示沒有。這(zhè)個方法成本低(dī)、檢驗結果迅速，操作(zuò)簡單;
當然了(le)，在蛋白(bái)研究的過程中不可能(néng)僅僅就這(zhè)幾種方法，還有噬菌體展示技術、等離子共振技術、抗體蛋白(bái)陣列技術等等，我們就不在這(zhè)裏一一詳述了(le)。相對(duì)來(lái)說，後面提出的這(zhè)些(xiē)方面在技術和(hé)成本上(shàng)有着更高(gāo)的需求，需要具備一定實力的企業才能(néng)展示，我們在後面再和(hé)大(dà)家詳細描述。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)抗體制備和(hé)定制服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
