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抗體純化在我們生物實驗中是必不可少的一步，它不僅能(néng)提純蛋白(bái)來(lái)提升蛋白(bái)結合的效率，而且能(néng)夠減少其他(tā)物質對(duì)實驗結果的影響。可以說，蛋白(bái)純化是後續實驗能(néng)否更加精确的保證。但(dàn)是，在蛋白(bái)純化過程中，我們常常會(huì)遇到(dào)很(hěn)多問題，這(zhè)些(xiē)問題可能(néng)會(huì)造成蛋白(bái)純化率不高(gāo)，更有甚者會(huì)造成蛋白(bái)出現(xiàn)更多雜(zá)質的情況。今天，普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊有關蛋白(bái)純化中一些(xiē)可能(néng)會(huì)影響到(dào)純化效率的幾個内容。
說到(dào)蛋白(bái)純化，其實原理(lǐ)很(hěn)簡單，它就是通過一些(xiē)工(gōng)藝分離出和(hé)産品相關的一些(xiē)雜(zá)質，以達到(dào)獲得高(gāo)純度、低(dī)潛在危害物的蛋白(bái)産品(主要去除過程中細胞、細胞碎片、宿主蛋白(bái)、宿主細胞核以及培養液中的一些(xiē)養料成分)。而在蛋白(bái)純化過程中，第一步就是離心和(hé)過濾。
在實驗室中，純化和(hé)離心隻需要單次離心即可完成，而在大(dà)規模蛋白(bái)純化中，則需要連續分離的方式，通過深層過濾、切向流過濾和(hé)連續流離心等方式來(lái)進行。
深層過濾相對(duì)簡單且前期的投入少。因爲深層過濾介質的孔徑分步廣，内表面積大(dà)，能(néng)夠通過孔徑截留和(hé)吸附雙重作(zuò)用(yòng)達到(dào)過濾的效果。但(dàn)是其本身不能(néng)達到(dào)無菌過濾，隻能(néng)起到(dào)初步純化的效果;
切向流濾器的使用(yòng)則相對(duì)廣泛一些(xiē)，因爲其流向可以減少細胞在膜表面的沉積，實現(xiàn)大(dà)體積細胞液不堵塞的效果。其主要使用(yòng)中空(kōng)纖維，表面積大(dà)，能(néng)夠在孔腔内形成高(gāo)剪切力;
連續流離心則是采用(yòng)碟片式離心機進行連續離心，大(dà)規模純化中則采用(yòng)分離模式。其原理(lǐ)相對(duì)簡單，離心機腔體爲錐形，收獲液靠近軸心，離心後通過軸心排出，細胞則在離心力的作(zuò)用(yòng)下(xià)聚集在錐形底部。但(dàn)是設備的操作(zuò)相對(duì)複雜(zá)，更加容易出現(xiàn)故障，需要一定的專業技術能(néng)力;
總的來(lái)說，離心爲純化的第一步，隻有做好(hǎo)了(le)這(zhè)一步，才能(néng)爲後續的純化過程打好(hǎo)基礎。而我們上(shàng)面提到(dào)的幾種方法，需要結合實際情況來(lái)進行選擇，搭配好(hǎo)相應的處理(lǐ)方式，這(zhè)樣才能(néng)更好(hǎo)地得到(dào)我們所需要的結果。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)純化服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
