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這(zhè)裏有一個技術難題等你(nǐ)解鎖
卵巢癌是婦科常見的惡性腫瘤之一，其發病隐匿，緻死率占各類婦科腫瘤的首位。研究卵巢癌發生、複發和(hé)耐藥機制等，有針對(duì)性地制定治療策略刻不容緩。如何高(gāo)效地從(cóng)卵巢癌中分離培養卵巢癌細胞，對(duì)卵巢癌的研究至關重要。
爲此，我們做了(le)什(shén)麽技術突破
成功在體外(wài)培養了(le)原位卵巢癌，算(suàn)不算(suàn)
并且使該卵巢癌在體外(wài)可增殖哦
後期還會(huì)用(yòng)于藥物藥敏篩選呢(ne)
悄悄告訴你(nǐ)，我們培養細胞有一套
采用(yòng)新型3D細胞培養技術
養好(hǎo)細胞不再難
有人會(huì)說，不就養個細胞，有什(shén)麽難的
真的挺難的~不信你(nǐ)看(kàn)~
[實例展示]
獲得2例卵巢癌患者的捐贈組織，進行了(le)2D培養與3D培養。
經培養發現(xiàn)：2例卵巢細胞在傳統的平面培養上(shàng)，細胞形态并未發現(xiàn)明(míng)顯的差異，在一周内還具有卵巢癌荷包蛋特征樣細胞形态，同時(shí)也(yě)含有一些(xiē)貼壁生長的間質細胞，随着培養時(shí)間的增長，卵巢癌細胞逐漸退化或死亡，其生長空(kōng)間被間充質細胞所占據（見圖1）。這(zhè)是目前原位腫瘤細胞體外(wài)培養的一道(dào)瓶頸。
圖1. 2例捐獻者分離細胞在2D培養條件下(xià)的生長情況
在三維培養條件下(xià)，可見細胞密度随培養時(shí)間的增加在逐漸增多且生長良好(hǎo)，随着培養時(shí)間的延長并未出現(xiàn)平面培養上(shàng)的纖維狀細胞逐漸增多的現(xiàn)象，可見三維培養更有利于腫瘤細胞的生長（見圖2）。同時(shí)，我們還通過MTT法檢測了(le)細胞在材料中的增殖情況（見圖3）發現(xiàn)：細胞的增殖活性與細胞狀态呈正相關，患者1較患者2組織分離獲得的細胞活性低(dī)，這(zhè)可能(néng)是卵巢癌的種類與分級有關。
圖2. 2例捐獻者分離細胞在3D培養條件下(xià)的生長情況
圖3. 2例捐獻者分離細胞在3D培養條件下(xià)的增殖情況
從(cóng)三維培養的增殖檢測數據也(yě)不難發現(xiàn)，在體外(wài)三維培養條件下(xià)癌細胞的增殖速度逐漸減緩，這(zhè)也(yě)更契合生物體内腫瘤的發生發展規律，腫瘤細胞雖較正常細胞增殖迅速，但(dàn)在體内腫瘤潛伏期及腫瘤竈轉移等均是一個隐秘而漫長的過程。
針對(duì)實驗室條件培養的2例卵巢癌細胞的三維形态，我們對(duì)照卵巢癌組織的病理(lǐ)分型特征，對(duì)此2例卵巢癌腫瘤進行了(le)初步診斷，獲得以下(xià)結論：
1. 患者2的卵巢癌腫瘤分級高(gāo)于患者1；
2. 從(cóng)三維細胞培養形态上(shàng)，患者1分離獲得的卵巢癌細胞呈荷包蛋樣且細胞大(dà)小(xiǎo)不一，在分離處理(lǐ)過程中有大(dà)量黃色黏液流出，且在分離初期細胞多聚團，考慮爲黏液性卵巢癌；
3. 從(cóng)三維細胞培養形态上(shàng)，患者2分離獲得的卵巢癌細胞細胞個大(dà)，呈顯著的荷包蛋樣且增殖速度較快(kuài)，腫瘤細胞惡性程度較高(gāo)，可能(néng)爲上(shàng)皮性囊腔腫瘤，可能(néng)存在轉移竈。
實驗取得了(le)令人振奮的結果：
經與患者病理(lǐ)檢測報(bào)告對(duì)比，最終發現(xiàn)我們根據三維培養的細胞形态得到(dào)的初步判斷結果與最終病理(lǐ)檢測結果基本一緻。
特别說明(míng)：本實驗由華中科技大(dà)學同濟醫(yī)院·陳剛教授團隊，提供卵巢癌組織材料及技術指導。
到(dào)此我們不得不提
本項研究最關鍵的技術——3D細胞培養
成功解決細胞培養這(zhè)一技術難題
3D細胞培養是一種模拟體内三維生長環境的細胞培養方式。通過讓細胞聚集成3D球體或者将細胞在成分結構類似于實體組織的三維結構載體上(shàng)粘附、伸展和(hé)生長，從(cóng)時(shí)間和(hé)空(kōng)間上(shàng)共同調控細胞的增殖和(hé)分化，使組織結構和(hé)功能(néng)得以較大(dà)程度保留。
與2D培養相比，3D培養更真實地再現(xiàn)了(le)細胞與細胞之間以及細胞與細胞間微環境的相互作(zuò)用(yòng)，更準确地模拟組織在正常生理(lǐ)狀态下(xià)情況及反應，突破了(le)傳統細胞培養耗時(shí)繁瑣，細胞産量微小(xiǎo)等局限性。
應用(yòng)：随着3D細胞培養技術不斷完善，以此爲基礎的新型高(gāo)通量藥物檢測及篩查系統正在成爲生物醫(yī)藥領域的技術新熱點，并逐漸在藥物研發、療效評估，毒性檢測及臨床檢測等方面發揮着越來(lái)越廣泛的作(zuò)用(yòng)。
重磅出擊
(Atagenix—3D細胞培養)
我們的3D細胞培養技術秘籍
——新型的3D細胞培養材料AccuraMatrix
國際領先、自(zì)主知(zhī)識産權的新型生物構架，用(yòng)于體外(wài)細胞3D培養及類組織器官（Organoid）的建立。
普健生物3D培養材料優點
1高(gāo)純度、低(dī)免疫原性；
2多層氣孔基質：與生理(lǐ)細胞外(wài)基質相似；
3細胞附着的可質子化表面：增強細胞附着；
4可調節物理(lǐ)和(hé)化學性質的基質材料：滿足不同類型細胞生長的特定要求；
5使用(yòng)廣泛，可應用(yòng)于細胞生長和(hé)分化、幹細胞研究、代謝(xiè)和(hé)毒理(lǐ)學研究、體内外(wài)血管生長研究、體外(wài)腫瘤細胞生物學特性研究、腫瘤異種移植模型研究等領域。
