自(zì)雜(zá)交瘤技術誕生以來(lái),鼠源性單克隆抗體在臨床診斷及治療等方面發揮了(le)巨大(dà)的作(zuò)用(yòng),但(dàn)鼠源單克隆抗體具有較強的免疫原性,在臨床應用(yòng)中會(huì)引起人抗鼠抗體(HAMA)反應, 導緻鼠源抗體半衰期縮短,治療效果減弱。随着抗體工(gōng)程的發展, 利用(yòng)抗體技術對(duì)鼠源抗體進行人源化改造是解決治療用(yòng)單克隆抗體的有效途徑。
抗體人源化
抗體人源化是指利用(yòng)DNA重組和(hé)蛋白(bái)質工(gōng)程技術,對(duì)抗體基因進行重組,可在保留鼠源抗體對(duì)抗原有效結合部位的同時(shí)最大(dà)限度地降低(dī)非結合部位的鼠源性,這(zhè)種通過重組基因表達的既有鼠源成分又有人源成分的抗體稱爲人源化抗體。當前正處于臨床研究的多種抗體中,嵌合抗體和(hé)人源化抗體所占比例大(dà)于70%。目前的人源化抗體,主要用(yòng)于腫瘤、自(zì)身免疫性疾病和(hé)心血管疾病的治療以及抗移植排斥反應和(hé)抗病毒感染等方面。
人源化抗體的分類
1嵌合抗體
利用(yòng)DNA重組技術,将異源抗體的輕、重鏈可變區(qū)基因插入含有人抗體恒定區(qū)的表達載體中,轉染哺乳動物細胞表達出嵌合抗體。
2改型抗體
改型抗體也(yě)稱CDR植入抗體(CDR grafting antibody),抗體可變區(qū)的CDR是抗體識别和(hé)結合抗原的區(qū)域,直接決定抗體的特異性。将鼠源單抗的CDR移植至人源抗體可變區(qū),替代人源抗體CDR,使人源抗體獲得鼠源單抗的抗原結合特異性,同時(shí)減少其異源性。
3全人源化抗體
全人源化抗體是指将人類抗體基因通過轉基因或轉染色體技術,将人類編碼抗體的基因全部轉移至基因工(gōng)程改造的抗體基因缺失動物中,使動物表達人類抗體,達到(dào)抗體全人源化的目的。
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抗體人源化制備流程:
抗體可變區(qū)/抗體全長測序
嵌合抗體設計(jì)表達及活性驗證
人源化設計(jì)(最關鍵)
人源化抗體表達純化
親和(hé)力及活性對(duì)比檢測
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普健生物抗體人源化優勢
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2、自(zì)主開(kāi)發的高(gāo)表達載體及細胞系,具有商業開(kāi)發license細胞系。
3、細胞系開(kāi)發--發酵條件優化--細胞罐發酵,完成整個治療性抗體的開(kāi)發。
4、9~18條人源化序列選擇,CDR移植、回複突變設計(jì)結合計(jì)算(suàn)機模拟人源化抗體結構并分析。
5、專業的質量評價體系,人源化抗體與嵌合抗體體外(wài)生物活性分析,FACS和(hé)SPR親和(hé)力檢測,同源物種交叉反應分析等。