什(shén)麽是内參抗體?如何挑選合适的内參抗體?

　　抗體因爲随着使用(yòng)需求的不同，也(yě)發展出了(le)很(hěn)多不同的類型，比如内參抗體、标簽抗體。這(zhè)些(xiē)抗體針對(duì)不同的使用(yòng)需求，有着不同的特性和(hé)使用(yòng)方法，所以，選擇合适的抗體，也(yě)是我們日常工(gōng)作(zuò)中非常重要的一環。那麽，什(shén)麽是内參抗體呢(ne)?它的作(zuò)用(yòng)又有哪些(xiē)呢(ne)?且看(kàn)普健生物和(hé)您一一講述。

　　什(shén)麽是内參抗體?

　　所謂的内參抗體，我們可以從(cóng)字面上(shàng)來(lái)解釋，就是内部參照抗體，它和(hé)目的抗體沒有直接聯系，而是一種精準制備抗體的輔助抗體。

　　比如我們需要對(duì)不同條件或不同組織細胞中表達的目的蛋白(bái)的相對(duì)多少進行比較，那麽就需要有相同的定量，這(zhè)樣才會(huì)具備比較的基礎。但(dàn)是在實驗中，可能(néng)會(huì)因爲蛋白(bái)濃度不太精準，或者在上(shàng)樣蛋白(bái)的時(shí)候，因爲操作(zuò)而産生偏差，這(zhè)個時(shí)候，就需要有一款内部參照抗體來(lái)進行校正作(zuò)用(yòng)。這(zhè)類抗體需要在冉細胞或組織間具備恒定的表達特性，而且表達量要高(gāo)。這(zhè)類抗體，我們稱之爲内參抗體。

　　如何挑選合适的内參抗體呢(ne)?

　　對(duì)于内參抗體的挑選需要注意到(dào)很(hěn)多細節方面的問題，通常我們可以結合如下(xià)四點進行挑選：

　　1、根據樣本來(lái)源挑選。針對(duì)哺乳動物的組織細胞樣本，我們可以從(cóng)GAPDH、COX4等産品中進行挑選，其他(tā)來(lái)源的樣本，則需要結合相關文(wén)獻挑選;

　　2、根據分子大(dà)小(xiǎo)挑選。針對(duì)分子量的不同，我們需要結合分子大(dà)小(xiǎo)來(lái)挑選合适的内參抗體。在WB實驗中，我們一般選擇大(dà)小(xiǎo)差異5kDa以上(shàng)，也(yě)就是說不要選擇分子量太過接近的，否則不利于後期的條帶分析;

　　3、結合表達位置挑選。一般的蛋白(bái)檢測可以考慮選擇那些(xiē)常用(yòng)的内參抗體(比如：β-actin、GAPDH抗體等)。當然了(le)，針對(duì)哪些(xiē)核蛋白(bái)很(hěn)定的，我們可以考慮結合文(wén)獻來(lái)進行選擇;

　　4、根據表達恒定性挑選。挑選的抗體需要看(kàn)其是否會(huì)受到(dào)條件變化的影響，比如溫度、PH值、濃度等方面的影響，這(zhè)個很(hěn)重要。比如，GAPDH常常用(yòng)來(lái)作(zuò)爲内參抗體，到(dào)那時(shí)在進行代謝(xiè)研究的時(shí)候，就不适用(yòng);

　　總的來(lái)說，内參抗體的選擇并沒有想象中的複雜(zá)，需要結合使用(yòng)需求，選擇合适的。當實在不知(zhī)道(dào)如何選擇的時(shí)候，我們可以結合相應的文(wén)獻來(lái)進行挑選，一般來(lái)說，都能(néng)夠選擇到(dào)合适的抗體産品。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供優質的抗體制備和(hé)定制服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。