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我們在進行蛋白(bái)表達的時(shí)候常常會(huì)接觸到(dào)一個概念：原核表達和(hé)真核表達。起初我一直以爲原核表達隻是蛋白(bái)表達的一種方式，用(yòng)來(lái)和(hé)真核蛋白(bái)表達進行區(qū)分。但(dàn)是後來(lái)才發現(xiàn)，這(zhè)個表達的意義不止于此。爲了(le)讓大(dà)家更加方便地了(le)解相關信息，普健生物在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家具體聊聊。
什(shén)麽是有原核蛋白(bái)表達?
所謂的原核蛋白(bái)表達其實就是通過基因克隆技術，将外(wài)源目的基因通過構建表達載體，并通過表達菌株，使得其在特定的原核生物中得以表達的方式。簡單來(lái)說，就是将目的基因克隆到(dào)載體的表達序列中，而後通過特定的原核生物表達出來(lái)的方式(目前最常用(yòng)的表達菌株爲大(dà)腸杆菌，也(yě)就是說，絕大(dà)多數的目的基因都是在大(dà)腸杆菌中表達出來(lái)的)。
那麽，原核蛋白(bái)表達的原理(lǐ)是什(shén)麽呢(ne)?
按照宿主來(lái)分，原核表達系統常用(yòng)的有大(dà)腸杆菌表達系統、芽孢杆菌表達系統、鏈黴菌表達系統。而大(dà)腸杆菌因爲其遺傳背景清晰，目的蛋白(bái)表達水(shuǐ)平高(gāo)、培養周期短、抗污染能(néng)力強等優點，使得其成爲原核表達的首選。
原核蛋白(bái)表達的流程爲：原核表達載體構建、轉化到(dào)高(gāo)效的表達宿主中、目的蛋白(bái)誘導表達、細菌擴大(dà)培養、制備蛋白(bái)提取物、目的蛋白(bái)純化。
看(kàn)這(zhè)個過程，相信大(dà)家應該都不會(huì)覺得困難。确實，首先通過基因工(gōng)程技術，将目的蛋白(bái)基因置入到(dào)載體基因中，這(zhè)個過程可以說非常的重要、而後通過一定的誘導手段，比如加入IPTG誘導劑，來(lái)誘導目的DNA的表達。當蛋白(bái)表達出來(lái)之後，我們再通過相應的方式，對(duì)所得蛋白(bái)進行相關的檢測，比如考馬斯亮(liàng)藍染色或免疫印迹等方法。相關檢測确定蛋白(bái)合格後，再通過蛋白(bái)純化的手段提純蛋白(bái)。
當然了(le)，在這(zhè)個過程中涉及到(dào)很(hěn)多細節操作(zuò)方面的問題，而且涉及到(dào)很(hěn)多操作(zuò)方面的小(xiǎo)技巧，這(zhè)些(xiē)方面都需要引起關注，可以說，這(zhè)些(xiē)細節方面的問題是實驗數據理(lǐ)想與否的關鍵因素。普健生物做爲一家擁有15年蛋白(bái)制備經驗的企業，專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供原核蛋白(bái)表達服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
