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蛋白(bái)質是生物體的基本組成成分，是生命功能(néng)的執行者。深入研究某種蛋白(bái)的功能(néng)及作(zuò)用(yòng)機制，對(duì)蛋白(bái)在醫(yī)藥、工(gōng)業、科研等方面的應用(yòng)具有重要價值。而要研究某一個特殊的蛋白(bái)，就要先将這(zhè)個蛋白(bái)從(cóng)生物體中分離純化出來(lái)。蛋白(bái)純化在蛋白(bái)工(gōng)程中是必不可少的一步，從(cóng)研究蛋白(bái)的結構與功能(néng)，到(dào)對(duì)蛋白(bái)進行修飾改造，以及最後批量開(kāi)發相關産品，首先都需要獲得單一的蛋白(bái)。
蛋白(bái)分離純化是用(yòng)生物工(gōng)程下(xià)遊技術從(cóng)混合物之當中分離純化出所需要得目的蛋白(bái)的方法，在蛋白(bái)質研究中起到(dào)橋梁作(zuò)用(yòng)，成爲當代生物技術行業的核心。蛋白(bái)純化工(gōng)作(zuò)複雜(zá)，耗時(shí)長，但(dàn)又十分重要。
蛋白(bái)純化總原則：
以合理(lǐ)的效率、速度、收率和(hé)純度，将目标蛋白(bái)分離出來(lái)，同時(shí)保留其生物學活性和(hé)化學結構完整性。
純化依據——蛋白(bái)不同的理(lǐ)化性質（如分子大(dà)小(xiǎo)、分子形狀、帶電特性、溶解特性、吸附性質、與配體的特異性結合、變性和(hé)複性等）。
常用(yòng)的蛋白(bái)質分離純化技術有膜分離技術、沉澱分離技術、電泳分離技術以及層析分離技術等。目前層析技術是蛋白(bái)純化領域的核心技術，也(yě)是應用(yòng)最多最爲廣泛的技術。
層析分離技術是根據被分離物與層析固定相之間的物理(lǐ)化學性質以及生物學性質的相互作(zuò)用(yòng)來(lái)進行分離。層析法的種類繁多，應用(yòng)較爲廣泛的有凝膠過濾層析、離子交換層析、疏水(shuǐ)層析以及親和(hé)層析。
不同的蛋白(bái)特性對(duì)應不同的純化方法：
分子大(dà)小(xiǎo)——凝膠過濾層析
帶電性——離子交換層析
疏水(shuǐ)性——疏水(shuǐ)層析
配體特異性——親和(hé)層析
在蛋白(bái)純化過程中，經常通過添加合适的标簽輔助蛋白(bái)純化，促進蛋白(bái)可溶性。
常用(yòng)的幾種蛋白(bái)純化标簽比較：
6His，蛋白(bái)純化首選标簽，分子量小(xiǎo)，對(duì)蛋白(bái)無影響，能(néng)純化可溶性/包涵體蛋白(bái)。
GST，增強蛋白(bái)可溶性，僅能(néng)純化可溶性蛋白(bái)，屏蔽毒性蛋白(bái)，标簽較大(dà)。
MBP，增強蛋白(bái)可溶性，屏蔽毒性蛋白(bái)，标簽較大(dà)，對(duì)蛋白(bái)結構/功能(néng)會(huì)有一定影響。
Myc，高(gāo)特異性，在天然洗脫條件下(xià)，使用(yòng)Myc标簽多肽來(lái)與重組蛋白(bái)進行競争，可溫和(hé)洗脫Myc标簽蛋白(bái)質。
SUMO，增強蛋白(bái)可溶性，切割特異性極高(gāo)，不殘留任何氨基酸，适合重組蛋白(bái)表達。
Strep，不會(huì)影響标簽蛋白(bái)的功能(néng)結構，更簡便，适合高(gāo)純度蛋白(bái)産出。
Flag，通常不與目的蛋白(bái)相互作(zuò)用(yòng)，純化效率高(gāo)，應用(yòng)廣泛。
當然，有時(shí)我們需要根據下(xià)遊實驗的需求将添加的蛋白(bái)标簽去除，這(zhè)時(shí)就要靠工(gōng)具酶了(le)☟
标簽切除蛋白(bái)酶：
Thrombin（Leu-Val-Pro-Arg▼Gly-Ser），
Enterokinase（Asp-Asp-Asp-Asp-Lys▼），
rTEV（Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln▼Gly）。
普健生物蛋白(bái)純化技術服務内容：
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标簽特異親和(hé)純化：His、GST、MBP、Strep、Flag
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離子交換純化
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肝素柱純化
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疏水(shuǐ)層析
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凝膠過濾層析
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蛋白(bái)鑒定：SDS-PAGE，HPLC，WB，蛋白(bái)濃度檢測，吸收光譜
