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我們在進行蛋白(bái)表達時(shí)，往往會(huì)涉及到(dào)一個概念：蛋白(bái)可溶性。它的意思是說，蛋白(bái)可溶于溶液中的分量。我們知(zhī)道(dào)，蛋白(bái)隻有溶于溶液中時(shí)才會(huì)發生作(zuò)用(yòng)，析出的蛋白(bái)則無法發生反應，所以，蛋白(bái)的可溶性在極大(dà)程度上(shàng)制約着蛋白(bái)的功能(néng)。那麽，有沒有什(shén)麽辦法來(lái)提升蛋白(bái)的可溶性呢(ne)?今天，普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊。
1、選擇可溶性更高(gāo)的工(gōng)程菌
蛋白(bái)是否可溶，在很(hěn)大(dà)程度上(shàng)取決于其二硫鍵以及是否能(néng)夠正确折疊的問題。所以，我們可以選擇那些(xiē)有利于二硫鍵形成的宿主菌，這(zhè)樣更有利于蛋白(bái)的表達;
2、添加一些(xiē)促溶的标簽
根據蛋白(bái)的特性，有意識地加入一些(xiē)能(néng)夠促進蛋白(bái)可溶性的标簽;
3、伴侶表達
在進行工(gōng)程菌表達時(shí)，可以同時(shí)加入一個能(néng)夠表達伴侶蛋白(bái)的質粒，這(zhè)個伴侶蛋白(bái)不能(néng)與表達外(wài)源蛋白(bái)的質粒出現(xiàn)質粒不相容的情況。然後，在結合實際情況來(lái)确定表達伴侶蛋白(bái)的質粒;
4、選擇合适的啓動子
蛋白(bái)可溶性的強弱也(yě)和(hé)啓動子的選擇有着極大(dà)的關系，強啓動子不僅能(néng)提升蛋白(bái)産量，同時(shí)也(yě)增強了(le)包涵體的形成，從(cóng)而提升蛋白(bái)的可溶性;
5、優化蛋白(bái)的培養條件
通過優化蛋白(bái)的表達環境，比如：誘導溫度、誘導劑濃度、誘導時(shí)間等，同時(shí)還可以通過優化培養基内的營養物質等來(lái)提升蛋白(bái)的表達;
對(duì)于不同的公司來(lái)說，提升表達蛋白(bái)可溶性方法有很(hěn)多，而且各不相同，但(dàn)是，這(zhè)些(xiē)方法都是在實驗過程中不斷總結所得，能(néng)夠應對(duì)絕大(dà)部分蛋白(bái)表達的問題。自(zì)然了(le)，蛋白(bái)表達經驗越多的公司，其應對(duì)蛋白(bái)表達問題的方法也(yě)越多，也(yě)越好(hǎo)。普健生物作(zuò)爲一家擁有10餘年蛋白(bái)抗體定制表達經驗的公司，專業爲你(nǐ)聽蛋白(bái)表達服務，如果您有需求，歡迎來(lái)電咨詢。
