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重組抗體表達相信大(dà)家已經耳熟能(néng)詳了(le)，通過重組抗體表達技術，能(néng)夠讓我們獲得很(hěn)多傳統抗體無法實現(xiàn)的功能(néng)，使得疾病醫(yī)治變得更加的簡單。但(dàn)是，對(duì)于很(hěn)多人來(lái)說，重組抗體表達的成功率不高(gāo)，但(dàn)是又和(hé)設計(jì)以及操作(zuò)沒有太大(dà)關系。這(zhè)是爲什(shén)麽呢(ne)?今天，普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊重組抗體表達中的一些(xiē)常見問題。
1、重組抗體穩定性不高(gāo)，如何提升?
一般來(lái)說，很(hěn)多重組抗體的穩定性都不強，我們可以通過優化洗脫條件，将高(gāo)PH值逐漸降低(dī)，選擇最适合的表達環境。同時(shí)，純化的樣本需要及時(shí)進行中和(hé)，如果有需求，可以選擇邊純化邊中和(hé)。對(duì)于純化後的樣品可以選擇在合适的低(dī)溫環境下(xià)保存，同時(shí)添加蛋白(bái)保護劑以降低(dī)蛋白(bái)的溶解速率;
2、哺乳動物表達系統，是否選擇CHO?
CHO細胞的使用(yòng)範圍非常的廣泛，但(dàn)是也(yě)并不是所有的環境下(xià)都适合。我們需要結合表達需求來(lái)進行綜合選擇，這(zhè)樣才能(néng)在更大(dà)程度上(shàng)保證重組蛋白(bái)的表達效率;
3、重組抗體的載體要如何選擇?
重組抗體表達所選載體和(hé)細胞最好(hǎo)配對(duì)使用(yòng)，如果選擇的非配套的，很(hěn)容易造成蛋白(bái)表達量低(dī)的情況;
4、如何提升重組抗體的表達量?
其實就是表達系統和(hé)方法的選擇，盡量選擇表達量高(gāo)的系統，表達細胞一定要選擇狀态好(hǎo)活性強的細胞，如果時(shí)間允許，還需要對(duì)表達進行優化，延長表達時(shí)間，以便于獲得質量更好(hǎo)的抗體;
5、有關抗體活性方面的判斷。
一般來(lái)說，真核表達系統所表達的抗體活性要強過原核表達，不過不同的抗體其穩定性不同，具體需要結合實際需求來(lái)選擇;
6、重組抗體的表達量可否通過高(gāo)通量篩選來(lái)實現(xiàn)?
答(dá)案是肯定的，采用(yòng)高(gāo)通量抗體表達系統和(hé)篩選，能(néng)夠有效提升抗體的表達量，當然了(le)，其中的費用(yòng)投入相對(duì)來(lái)說也(yě)要高(gāo)一些(xiē)，所以，我們需要結合實際情況來(lái)進行選擇;
總的來(lái)說，重組抗體表達過程中需要注意的事(shì)項有很(hěn)多，一些(xiē)細節方面的操作(zuò)也(yě)能(néng)在極大(dà)程度上(shàng)制約着抗體的表達量。所以，在日常使用(yòng)中，我們需要嚴格按照是按步驟來(lái)進行相關操作(zuò)，這(zhè)樣才能(néng)在更大(dà)程度上(shàng)保證重組抗體的表達量。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供重組抗體表達服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
