單B細胞技術的工(gōng)作(zuò)流程是怎樣的?

　　單B細胞技術是現(xiàn)階段單克隆抗體制備的主要方法，其保留了(le)輕重鏈可變區(qū)的天然配對(duì)，具備快(kuài)捷、細胞數量少、高(gāo)效等優勢。單B細胞技術通過直接擴增單B細胞的VH和(hé)VL編碼基因，從(cóng)而生産出高(gāo)質量的單克隆抗體。那麽，單B細胞技術的具體流程是怎樣的?

　　1、單個B細胞分離

　　從(cóng)淋巴組織中分離出單B細胞，而後通過顯微操作(zuò)、激光捕獲顯微切割以及熒光激活細胞分選等技術，中挑選出具備特異性的細胞;

　　2、單B細胞抗體測序及克隆

　　通常我們會(huì)采用(yòng)96孔闆進行單細胞的cDNA合成，而後通過相應的技術手段對(duì)其進行擴增。而後将表達載體轉染到(dào)哺乳動物細胞中，而後對(duì)單克隆抗體進行體外(wài)表達;

　　3、抗體表達及篩選

　　鑒定抗體片段的特異性和(hé)生物活性，而後将攜帶有目的抗體的表達載體在對(duì)應的表達載體中進行表達。

　　其實大(dà)家不難看(kàn)出，單B細胞技術開(kāi)發和(hé)雜(zá)交瘤細胞抗體表達有着很(hěn)多相似之處，隻是在細胞制備最初階段有着一定的區(qū)别，之後的過程都非常的類似。作(zuò)爲現(xiàn)階段能(néng)夠制備高(gāo)質量單克隆抗體的熱門(mén)方式，單B細胞技術将會(huì)得到(dào)進一步的開(kāi)發，活得更好(hǎo)的制備方式。普健生物專業爲您提供單B細胞單克隆抗體制備服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。