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所謂的細胞培養，指的是通過體外(wài)培養技術實現(xiàn)細胞分裂等生理(lǐ)狀态的過程。即在無菌條件下(xià)，從(cóng)機體中提取細胞，并讓其在模拟體内環境下(xià)繼續生存、生長且繁殖的過程。通過細胞培養，我們可以獲得大(dà)量、性質相同的細胞從(cóng)而進行抗體蛋白(bái)等産品的制備。那麽，細胞培養的具體步驟是怎樣的呢(ne)?今天，普健生物就在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家具體聊聊。
1、細胞傳代
當細胞彙合度達到(dào)80-90%時(shí)，吸出培養液，再加入PBS潤洗細胞，吸出PBS後加入胰酶放(fàng)入培養箱。具體的消化時(shí)間因細胞而異，而後通過吹打細胞使之脫落，并盡量讓其保持單科細胞的懸浮液。之後，再通過離心機離心，吸出上(shàng)清液并丢棄。最後再加入到(dào)培養基，補足培養液後再繼續培養即可;
2、細胞換液
吸出原培養液，并加入PBS混合後晃動培養瓶，潤洗細胞後吸出PBS。而後加入含新鮮血清的培養基，最後繼續培養即可;
3、細胞凍存
按照7:2:1的比例加入培養基、血清、DMSO配置好(hǎo)凍存液，而後将其至于室溫中備用(yòng)。将細胞制備成懸液，通過離心機去除上(shàng)清液加入凍存液後搖勻。将所得混合液均勻分裝，密封後選擇合适溫度凍存;
4、細胞複蘇
去除凍存的細胞，至于37度熱水(shuǐ)中解凍。在解凍過程中，需要對(duì)其進行觀察，當隻有一小(xiǎo)塊冰存在時(shí)，将其從(cóng)水(shuǐ)中取出。将細胞懸浮液吸入離心管中，搖勻後離心5分鐘(zhōng)，并去除上(shàng)清液。而後在其中加入培養液并培養，24小(xiǎo)時(shí)後換一次培養液即可;
總的來(lái)說，細胞保存的過程并沒有多麽複雜(zá)，但(dàn)是在凍存和(hé)解凍的過程中有很(hěn)多細節問題需要引起注意。而且關于細胞凍存的溫度需要特别注意，否則很(hěn)容易造成細胞的損壞。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供細胞培養凍存等服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
