聯系我們
用(yòng)于疾病的單克隆抗體是一類快(kuài)速發展的藥物，具有親和(hé)力強、特異性強、半衰期長和(hé)藥理(lǐ)學效力強的特點。這(zhè)些(xiē)特性使抗體成爲開(kāi)發針對(duì)多種人類疾病的有效治療方法的成熟平台。它們的應用(yòng)領域不僅限于标準的免疫球蛋白(bái)G (IgG)格式，還可以擴展到(dào)抗體片段(scFv, VHH)、藥物偶聯物和(hé)雙特異性等新型格式的"不可藥物化"靶點。随着衆多抗體治療藥物(Ab1)不斷進入臨床前開(kāi)發和(hé)臨床試驗，這(zhè)些(xiē)項目對(duì)高(gāo)質量的關鍵生物分析試劑的需求很(hěn)高(gāo)。在這(zhè)種情況下(xià)，抗獨特型抗體(（Anti-idiotype antibody, Anti-ID Abs)已成爲臨床前和(hé)臨床階段生物分析應用(yòng)的優選方案之一。常用(yòng)的制備方法包括體内雜(zá)交瘤技術、體外(wài)噬菌體展示免疫抗體庫或合成抗體庫。
兔單抗以其高(gāo)親和(hé)力和(hé)多樣性而聞名，使其成爲治療候選生物分析程序中高(gāo)度專業化研究試劑的潛在有用(yòng)來(lái)源。過去兔單克隆抗體的産生采用(yòng)雜(zá)交瘤技術;然而，目前的發現(xiàn)是由更強大(dà)的單個B細胞培養和(hé)克隆方法驅動的。
高(gāo)質量的抗獨特型抗體(Anti-ID Abs, Ab2)，特别是CDR特異性的Ab2，對(duì)開(kāi)發敏感、特異和(hé)穩健的PK檢測和(hé)抗藥物抗體(ADA)檢測至關重要，以支持藥物開(kāi)發項目的臨床前和(hé)臨床研究。研究人員使用(yòng)基于兔單個B細胞技術的方法來(lái)擴大(dà)了(le)常規制備大(dà)樣本抗獨特型抗體的能(néng)力，并且取得了(le)很(hěn)高(gāo)的成功。
基于單個B細胞技術的Xten™ Mab Single B兔單克隆抗體開(kāi)發有三個主要流程，鑒定和(hé)分離單個B細胞；擴增和(hé)克隆抗體基因；表達、篩選和(hé)鑒定抗原特異性抗體。
Xten™ Mab Single B兔單克隆抗體開(kāi)發以單個B細胞爲起始點，利用(yòng)每個B細胞隻産生一種特異性抗體的特性，直接從(cóng)免疫的兔子中通過随機分離和(hé)抗原特異性分離兩種方式從(cóng)外(wài)周血或淋巴組織中分離單B細胞，從(cóng)單個B細胞中擴增出抗體基因，進而獲得抗原特異性抗體。該技術所制備的抗體具有高(gāo)通量、高(gāo)效率、高(gāo)穩定性、高(gāo)特異性等優點，保留了(le)豐富的基因多樣性和(hé)輕重鏈可變區(qū)的天然配對(duì)，應用(yòng)前景廣泛，是最高(gāo)效的抗體篩選方法之一。特别是在快(kuài)速應對(duì)病原微生物傳染病的抗體開(kāi)發上(shàng)有着巨大(dà)優勢。
在這(zhè)項研究中，研究人員建立了(le)一種富集IgG+ B細胞的方法，并從(cóng)外(wài)周血單個核細胞(PBMC)中鑒定出抗原特異性IgG+ B細胞。通過基于磁珠的負向選擇策略有效地清除PBMCs中的非IgGB細胞，包括IgM B細胞，髓系細胞和(hé)T細胞。這(zhè)種技術不僅顯著提高(gāo)了(le)IgG+ B細胞的數量，而且還縮短了(le)分選時(shí)間，從(cóng)而有可能(néng)提高(gāo)B細胞的存活率，這(zhè)有助于提高(gāo)PCR及後續分子克隆的成功率。
在臨床前開(kāi)發和(hé)臨床試驗期間，抗獨特型抗體是PK和(hé)ADA檢測所需的寶貴試劑，用(yòng)于治療藥物的生物分析支持。高(gāo)靈敏度、高(gāo)特異性、高(gāo)親和(hé)力以及表位結合特異性是該類抗體試劑的重要特點。基于兔單克隆B細胞技術發現(xiàn)的單克隆抗體使研究人員能(néng)夠在滿足嚴格的生物分析性能(néng)要求的同時(shí)，在多種單克隆抗體項目中持續、高(gāo)效和(hé)高(gāo)産地制備出具有所需特性的單克隆抗獨特型抗體組合，爲單抗治療開(kāi)發項目的生物分析支持提供了(le)有價值的關鍵試劑。
參考文(wén)獻
WeiYu Lin,Rapid identification of anti-idiotypic mAbs with high affinity and diverse epitopes by rabbit single B-cell sorting-culture and cloning technology,PLoS One, December 21, 2020.
