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非洲豬瘟(Africanswinefever，ASF)是由非洲豬瘟病毒(Africanswinefevervirus,ASFV)感染豬而引起的一種急性、烈性傳染病，死亡率可達100%，已被世界動物衛生組織(WorldOrganizationforAnimalHealth,WOAH)列爲法定報(bào)告動物疫病。目前尚無有效藥物和(hé)疫苗用(yòng)于治療和(hé)預防ASF，主要通過臨床診斷和(hé)撲殺感染動物來(lái)控制疫情傳播。建立快(kuài)速、精準和(hé)高(gāo)效的診斷方法對(duì)于疫病防控至關重要。當前，國内外(wài)ASF相關診斷技術主要包括傳統病原學診斷技術、新型病原學診斷技術以及血清學診斷技術等。
傳統病原學診斷技術
利用(yòng)病原學診斷技術能(néng)夠在ASF疫情早期檢測出動物體内是否攜帶病毒。傳統病原學診斷技術主要包括病毒分離實驗和(hé)紅(hóng)細胞吸附實驗(haemadsorption，HAD)。與血清學檢測方法相比，病原學檢測結果可以直接判斷是否感染病毒。此外(wài)，病毒核酸檢測包括聚合酶鏈式反應(polymerasechainreaction,PCR)和(hé)實時(shí)熒光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qPCR)等方法，具有靈敏度高(gāo)的特點。傳統病原學診斷技術在ASF的早期診斷和(hé)流行病學調查中發揮了(le)重要作(zuò)用(yòng)，可降低(dī)病毒傳播風(fēng)險，從(cóng)而預防ASF的大(dà)規模傳播流行，減少ASF暴發導緻的經濟損失。
新型病原學診斷技術
随着對(duì)ASFV的深入研究和(hé)分子生物學技術的發展，一系列新型核酸診斷技術逐漸被開(kāi)發，如微滴數字PCR(dropletdigitalpolymerasechainreaction,ddPCR)檢測技術、LAMP技術、重組酶聚合酶擴增(recombinasepolymeraseamplification,RPA)技術和(hé)以CRISPR/Cas(clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeats/CRISPR-associatedproteinssystem)爲基礎的檢測技術等，這(zhè)些(xiē)新型診斷技術爲ASF的精确診斷和(hé)有效防控提供了(le)更加全面的支持。
血清學診斷技術
血清學診斷是基于抗原抗體反應來(lái)診斷和(hé)監測是否存在病毒感染。WOAH推薦的ASF血清學檢測方法包括酶聯免疫吸附試驗(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)、間接免疫熒光實驗(indirectimmunofluorescenceassay,IFA)、間接免疫過氧化物酶實驗(indirectimmunoperoxidasetest,IPT)及免疫層析實驗等。血清學檢測可以用(yòng)于豬群疫病狀态的定期監測，能(néng)夠發現(xiàn)病毒的慢性感染，有利于控制潛在疫情的發生和(hé)擴散。
目前，ASF檢測技術主要包括病原學與血清學檢測方法，每種方法各有其優缺點。在ASF病原學檢測方面，PCR和(hé)qPCR檢測靈敏性高(gāo)，但(dàn)其檢測結果易出現(xiàn)假陽性；LAMP和(hé)RPA等無需專業設備，但(dàn)對(duì)人員和(hé)工(gōng)作(zuò)環境要求高(gāo)，易造成氣溶膠污染；ddPCR具有高(gāo)敏性和(hé)特異性，但(dàn)昂貴的實驗設備限制了(le)其臨床應用(yòng);利用(yòng)CRISPR/Cas系統進行檢測的技術仍然處于初步研發階段，尚未有商品化的産品。近期流行病學調查發現(xiàn)了(le)較低(dī)毒力的ASFV毒株，能(néng)夠引起慢性或持續性感染，臨床檢測可能(néng)會(huì)出現(xiàn)病毒核酸檢測陰性但(dàn)抗體檢測陽性的情況，給ASF病原學診斷帶來(lái)了(le)很(hěn)大(dà)的挑戰。
參考文(wén)獻
ZHANG Yuan-yuan, JIN Jia-xin, ZHAO Xu-yang, ZHANG Shuai, LIU Yue-yue, LI Xiang-lin, SUN Ai-jun, LIN Shu-qian, ZHUANG Guo-qing. Research Progress of Novel Diagnostic Methods of African Swine Fever. Journal of Chinese Biotechnology, 2023, 43(10): 62-71 doi:10.13523/j.cb.2305012
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