在兔單克隆抗體制備的過程中,常常會(huì)因爲這(zhè)樣或那樣的原因導緻實驗的失敗,很(hěn)多時(shí)候是一些(xiē)細節操作(zuò)方面的問題導緻,其他(tā)則是因爲實驗設計(jì)方面的問題。有鑒于此,普健生物在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家盤點有關兔單克隆抗體制備過程中的一些(xiē)常見問題及其解決辦法。
1、抗體産量低(dī)
這(zhè)也(yě)是抗體制備中最常見的一個問題,導緻這(zhè)個現(xiàn)象的原因也(yě)很(hěn)多。可以通過提高(gāo)抗原免疫方案、增加免疫次數或者通過使用(yòng)強化佐劑的方式來(lái)提升其免疫反應;
2、抗體特異性不足
所得抗體的特異結合性較差,會(huì)和(hé)非目标蛋白(bái)相結合。當碰到(dào)這(zhè)種情況時(shí),我們可以選擇重新選擇抗原,優化抗原純度;
3、抗體親和(hé)力不足
一般來(lái)說,出現(xiàn)這(zhè)種現(xiàn)象的原因是因爲兔單抗的親和(hé)力不足導緻。可以通過調整免疫方案、優化抗原選擇以及優化純化步驟等方式來(lái)提升抗體親和(hé)力;
4、雜(zá)交瘤細胞融合率低(dī)
可能(néng)是因爲溫度、環境等融合條件選擇不合适。我們可以通過優化融合條件,結合細胞的特性,設置合适的融合環境,或者嘗試其他(tā)融合方法;
5、抗體穩定性差
主要是因爲單克隆細胞缺乏穩定性,從(cóng)而導緻抗體産量不穩定。我們可以通過不定期測試細胞穩定性來(lái)提升所得抗體的穩定性,也(yě)可以通過選擇更加穩定的單克隆抗體細胞進行擴增來(lái)提升抗體的穩定性;
6、抗體受到(dào)污染
主要原因是因爲細胞或抗原受到(dào)污染。可以通過适當地提升純度來(lái)解決;
當然了(le),在實驗過程中,我們需要做好(hǎo)相應的實驗記錄,并記錄好(hǎo)詳細的實驗步驟,以便于後期進行相關查詢。在兔單克隆抗體制備的過程中,我們需要注意好(hǎo)相關細節問題,做好(hǎo)相應的優化和(hé)調整策略,這(zhè)樣,才能(néng)更好(hǎo)地保證抗體的制備。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供兔單克隆抗體制備服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。