聯系我們
在單克隆抗體制備的方法中，雜(zá)交瘤技術的使用(yòng)是非常頻繁的。雜(zá)交瘤技術是在體細胞融合技術上(shàng)發展起來(lái)的一種技術，它通過将免疫動物細胞的脾細胞與骨髓瘤細胞相融合，所得細胞不僅能(néng)夠實現(xiàn)體外(wài)連續傳代，更是能(néng)持續性制備抗體。
雜(zá)交瘤技術的原理(lǐ)：
雜(zá)交瘤技術的基本原理(lǐ)是通過将兩種細胞融合，讓融合所得的細胞能(néng)夠同時(shí)擁有兩者的特征。而我們常說的雜(zá)交瘤抗體制備技術是通過将經過免疫的小(xiǎo)鼠脾細胞和(hé)骨髓瘤細胞，所得細胞既具備抗體分泌功能(néng)，更是能(néng)夠實現(xiàn)體外(wài)連續培養，具備所謂的永久性。
雜(zá)交瘤技術的步驟：
1、選擇合适的細胞并進行融合
我們知(zhī)道(dào)，脾髒是B細胞聚集的重要場所，也(yě)就是說，隻要我們對(duì)機體進行刺激，在脾髒内都會(huì)出現(xiàn)明(míng)顯的抗體應答(dá)。所以，我們可以通過在脾髒中提取免疫應答(dá)後的B細胞，并将其與骨髓瘤細胞相融合，而後加入細胞融合劑促使兩種細胞相融合;
2、選擇合适的培養基
細胞的融合是一個随機的過程，融合後的細胞可能(néng)是脾細胞與脾細胞、脾細胞與B細胞、B細胞與B細胞、未融合的脾細胞、未融合的B細胞以及細胞的多聚體等。結合細胞融合所需的營養選擇合适的培養基，通過5-7天的培養後，多聚體和(hé)未融合的細胞會(huì)自(zì)動篩除。而後，我們再将融合後的雜(zá)交瘤細胞篩選出來(lái)即可;
3、細胞篩選及稀釋
細胞的篩選主要分爲兩步來(lái)進行，第一步是融合細胞的篩選，将成功融合的細胞從(cóng)混合物種篩選出來(lái)。第二步是特異性篩選，将能(néng)夠産生我們所需抗體的細胞進行特異性篩選;
而後，将篩選出來(lái)的融合細胞進行充分稀釋，并分配到(dào)培養闆上(shàng)，保證每個空(kōng)中至少有數個細胞(這(zhè)一過程也(yě)被稱爲克隆化)。而後，在将這(zhè)些(xiē)陽細胞進行再次克隆化，然後再利用(yòng)其特異性篩選出合适的細胞。而後對(duì)所得細胞進行增殖、凍存;
雜(zá)交瘤細胞技術作(zuò)爲單克隆抗體制備的重要手段，所得抗體無論在質量還是數量上(shàng)都有着極大(dà)的優勢。雖然說随着技術的不斷發展，各種全新的技術也(yě)應運而生，但(dàn)是雜(zá)交瘤細胞技術依然是現(xiàn)階段使用(yòng)非常廣泛的方式之一，而且随着技術的不斷完善，相信未來(lái)的使用(yòng)會(huì)變得更加的廣泛。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供單克隆抗體制備服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
