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在生物技術研究(抗體藥物開(kāi)發、蛋白(bái)研究等)中，常常需要使用(yòng)到(dào)穩定細胞株的構建來(lái)提升蛋白(bái)高(gāo)親和(hé)力和(hé)批次一緻性。采用(yòng)穩定細胞株構建能(néng)夠提供可靠的平台，更是在生物制藥和(hé)基因治療等領域有着廣泛的使用(yòng)。下(xià)面，普健生物具體和(hé)大(dà)家詳細介紹穩定細胞株的構建。
那麽，什(shén)麽是穩定細胞株呢(ne)?穩定細胞株就是通過基因工(gōng)程将外(wài)源基因引入到(dào)宿主細胞中，然後通過培養、篩選等重複操作(zuò)，篩選出能(néng)夠重複制備目标蛋白(bái)的細胞群體。
在穩定細胞株構建的過程中，有兩項核心步驟需要特别注意，分别是宿主細胞的選擇以及表達載體的構建，隻有做好(hǎo)了(le)這(zhè)兩方面的工(gōng)作(zuò)，才能(néng)更好(hǎo)地進行細胞株的構建。
宿主細胞的選擇：常用(yòng)的宿主細胞較多，比如CHO細胞、HEK細胞等，需要結合宿主細胞的生長特性、表達水(shuǐ)平以及生産成本等綜合考慮;
表達載體的構建：其實就是将目标基因導入到(dào)宿主細胞中的過程。常見的表達載體主要包含目标基因、選擇基因、調控原件等，主要目的就是确保目的基因的穩定表達;
穩定細胞株構建的方法主要有兩種：質粒穩定細胞系以及基因整合穩定細胞系。
質粒穩定細胞株構建的流程如下(xià)：
1、宿主選擇。選擇合适的宿主來(lái)進行進一步的細胞株構建;
2、載體構建。通過質粒來(lái)構建載體;
3、細胞轉染。将構建好(hǎo)的質粒轉染到(dào)宿主細胞内;
4、細胞株篩選。通過培養及篩選，重複操作(zuò)多次後，篩選出合适的細胞株;
基因組整合穩定細胞株構建的流程如下(xià)：
1、選擇合适的細胞株。選擇出合适的細胞作(zuò)爲宿主;
2、構建合适的載體。整合載體，将目标基因整合到(dào)宿主中;
3、細胞轉染。将構建出來(lái)的載體導入到(dào)宿主細胞中;
4、篩選細胞系。通過标記基因進行細胞系的篩選和(hé)擴增;
穩定細胞株的優勢：
1、實現(xiàn)持久表達。穩定細胞株能(néng)夠長久且穩定地表達目标蛋白(bái);
2、更高(gāo)的可控性。可以通過調控原件來(lái)時(shí)間對(duì)目的基因的調控;
3、實現(xiàn)大(dà)規模生産。适合用(yòng)于大(dà)規模生産;
穩定細胞株的構建在生物研究以及應用(yòng)上(shàng)有着廣泛的應用(yòng)，因爲其能(néng)夠實現(xiàn)持久性表達，而且能(néng)夠實現(xiàn)大(dà)規模生産，使得其得到(dào)非常廣泛的使用(yòng)。當然了(le)，因爲其技術要求較高(gāo)，而且制備周期非常的長，所以，對(duì)于一些(xiē)蛋白(bái)制備續期來(lái)說，不适合使用(yòng)。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供穩定細胞株構建服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
