PD-1抗體被吃掉又怎樣，自(zì)有PNGaseF來(lái)救它_亞聯美華（武漢）生物科技有限責任公司

天上(shàng)有太陽，

夜晚照樣黑暗，

還好(hǎo)地球是圓的。

花(huā)兒會(huì)凋謝(xiè)，

就像時(shí)光，

可是春天總會(huì)來(lái)。

政治書上(shàng)說，

任何事(shì)物都有兩面，

正如黑和(hé)白(bái)。

如果藥物會(huì)失效，

難道(dào)人類要坐(zuò)以待斃？

……

我不談辯證法，

我隻想講一講，

PD-1抗體與PNGaseF的愛恨情仇。

↓

當身體發生感染時(shí)，感染附近區(qū)域可變紅(hóng)、腫和(hé)熱。這(zhè)種發炎過程有助于排除體内的受損細胞和(hé)病原體等有害刺激并開(kāi)始愈合過程。但(dàn)若炎症長期不消退則會(huì)損害周圍的健康組織。爲了(le)限制這(zhè)種損害，細胞會(huì)在其表面表達PD-L1蛋白(bái)（Programmed death-ligand 1，程序性死亡配體1）。當PD-L1蛋白(bái)跟T細胞表面的PD-1蛋白(bái)（programmed death 1，程序性死亡蛋白(bái)1）接觸并發生反應時(shí)，此T細胞便會(huì)凋亡，則該區(qū)域不發炎。癌腫瘤的生長常與慢性炎症相關聯。腫瘤細胞和(hé)正常細胞之間有許多相似之處，而且腫瘤細胞可在其表面表達很(hěn)多種蛋白(bái)質，這(zhè)都使抗癌藥物發展更具挑戰性。

通過調動自(zì)身的免疫系統來(lái)對(duì)抗腫瘤，是一種越來(lái)越流行的癌症治療方法，稱爲腫瘤免疫治療。這(zhè)種做法是讓自(zì)身适應并最終接管對(duì)抗腫瘤的過程，使患者更健康、經受的副作(zuò)用(yòng)更少。其中，PD-1和(hé)PD-L1抗體藥物已成爲這(zhè)種新型治療方法的支柱，因爲它們大(dà)多數表達在腫瘤細胞的表面，而在正常的細胞中幾乎不表達。這(zhè)使它們成爲很(hěn)好(hǎo)的候選藥物靶點，因爲這(zhè)樣藥物對(duì)健康細胞的傷害較少。

PD-1抗體的抗癌效果是前所未有的，一次次地在美(měi)國臨床腫瘤年會(huì)上(shàng)刮起黑色旋風(fēng)。據權威期刊《新英格蘭醫(yī)學雜(zá)志》編委表述：PD-1抗體是過去30年裏抗癌效果最好(hǎo)的。有分析認爲，PD-1抗體的市場可能(néng)會(huì)達到(dào)350億美(měi)元。臨床實驗也(yě)表明(míng)，跟其他(tā)免疫療法相比，PD-1和(hé)PD-L1抗體藥物能(néng)縮小(xiǎo)更多種腫瘤和(hé)對(duì)更多患者有效。以前的免疫療法反應率隻有10%，而PD-1和(hé)PD-L1藥物對(duì)25-40%的患者都有效，這(zhè)些(xiē)藥物也(yě)顯示較低(dī)的毒性水(shuǐ)平。與那些(xiē)使用(yòng)其他(tā)标準癌症治療方法的患者相比，使用(yòng)這(zhè)種藥物的患者可以活得更長。

目前臨床試驗中已經包括多種針對(duì)PD-1通路阻斷的單克隆抗體藥物。然而，不是所有患者都會(huì)對(duì)PD-1抗體有響應。目前來(lái)看(kàn)，各疾病對(duì)PD-1抗體的響應率如下(xià)：黑色素瘤患者（17-40%）、肺癌（10-30%）、膀胱癌（25%）、卵巢癌（6-23%）、頭頸癌（14-20%）、霍奇金(jīn)淋巴瘤（87%）、肝癌（20%）、腎細胞癌（20%-30%）。

2017年5月10日，一篇發表在《科學轉化醫(yī)學》期刊上(shàng)的論文(wén)《In vivo imaging reveals a tumor-associated macrophage–mediated resistance pathway in anti-PD-1 therapy》可以給我們答(dá)案：

論文(wén)出自(zì)哈佛大(dà)學醫(yī)學院附屬麻省總醫(yī)院的Mikael J. Pittet教授團隊，他(tā)們首先給PD-1抗體加上(shàng)黃色标記，再利用(yòng)活體顯微鏡實時(shí)監測标記後的PD-1抗體在結腸癌小(xiǎo)鼠模型中的動向。在将标記的PD-1抗體注射入結腸癌模型小(xiǎo)鼠體内5分鐘(zhōng)後，就發現(xiàn)腫瘤微環境内的T細胞上(shàng)有了(le)染色标記。最開(kāi)始标記的PD-1抗體結合到(dào)腫瘤浸潤T細胞周圍而幾分鐘(zhōng)後在T細胞表明(míng)形成色塊，之後這(zhè)些(xiē)色塊都在腫瘤相關巨噬細胞内。

注射早期小(xiǎo)鼠PD-1抗體從(cóng)T細胞到(dào)巨噬細胞的轉移過程

爲了(le)深入了(le)解巨噬細胞吃掉PD-1抗體的過程，研究者首先提取了(le)三種腫瘤模型中小(xiǎo)鼠體内相關細胞，發現(xiàn)大(dà)部分的腫瘤相關巨噬細胞内都有PD-1抗體。數據線性回歸分析發現(xiàn)，巨噬細胞吃掉抗體與巨噬細胞的數量無關：即使巨噬細胞的數量極低(dī)，也(yě)能(néng)将PD-1吃光，而且巨噬細胞不會(huì)主動與PD-1抗體結合。研究者随後在體外(wài)創建了(le)一個由骨髓分離得到(dào)的巨噬細胞和(hé)T細胞共培養體系：首先将T細胞與标記的PD-1抗體共培養，然後與巨噬細胞共培養，結果顯示标記後的PD-1抗體在數分鐘(zhōng)内就從(cóng)T細胞轉移至巨噬細胞中，這(zhè)不能(néng)僅僅歸結爲巨噬細胞的吞噬作(zuò)用(yòng)，因爲在加入了(le)吞噬抑制劑後，這(zhè)一轉移仍然很(hěn)快(kuài)就發生，并且巨噬細胞不會(huì)吞噬沒有與T細胞結合的PD-1抗體。

既然腫瘤相關巨噬細胞并不與PD-1抗體結合，也(yě)不會(huì)在注射的早期吃掉PD-1抗體。因此研究者推測，PD-1抗體的轉移是通過一種非抗原特異性機制。随後研究人員發現(xiàn)巨噬細胞表面存在Fcγ受體，這(zhè)一受體與T細胞PD-1抗體複合物上(shàng)Fc結構域相結合，介導PD-1抗體的吞噬。随後利用(yòng)以流式細胞計(jì)監測的抗體轉移實驗證明(míng)了(le)這(zhè)一發現(xiàn)：T細胞首先與染色後的PD-1抗體共培養30分鐘(zhōng)，然後與巨噬細胞一起培養，最後用(yòng)流式細胞計(jì)分析，大(dà)量PD-1抗體在巨噬細胞内被測出。然而，如果在實驗開(kāi)始時(shí)加入Fcγ受體抑制劑，那麽PD-1抗體就不會(huì)從(cóng)T細胞轉移到(dào)巨噬細胞。

之後研究人員通過酶偶聯免疫吸收劑實驗，發現(xiàn)巨噬細胞與T細胞以及IgG2a抗體（與鼠PD-1抗體同源）共培養後， IgG2a抗體同樣被巨噬細胞降解。由于Fc/FcγR與抗體的結合與抗體的Fc結構域上(shàng)的多糖結構相關，研究人員分析了(le)小(xiǎo)鼠的PD-1抗體以及人類PD-1抗體，結果發現(xiàn)小(xiǎo)鼠和(hé)人類PD-1抗體上(shàng)主要糖的類型是相同的，因此他(tā)們推測小(xiǎo)鼠體内Fcγ受體介導的抗體轉移也(yě)會(huì)發生在人體内。随後他(tā)們在體外(wài)将人PD-1抗體nivolumab用(yòng)AF647标記并與免疫 T細胞共培養，之後從(cóng)人體血液單核細胞中分離出巨噬細胞，再将兩者共培養3天，同樣看(kàn)到(dào)PD-1抗體轉移到(dào)巨噬細胞，轉移同樣可以被Fcγ受體抑制劑抑制，證明(míng)了(le)Fcγ受體也(yě)可以調節nivolumab在人體的攝取。

他(tā)們利用(yòng)一種叫做PNGaseF的酶來(lái)除去小(xiǎo)鼠PD-1抗體上(shàng)的糖鏈，然後用(yòng)AF647标記，發現(xiàn)除去糖之後的PD-1仍能(néng)與T細胞結合，卻不會(huì)被巨噬細胞吃掉。而且Fcγ受體被抑制後PD-1抗體與T細胞結合的時(shí)間顯著延長，并且Fcγ受體被阻斷的所有小(xiǎo)鼠結腸癌模型對(duì)PD-1抗體都産生了(le)響應，所有小(xiǎo)鼠腫瘤都被完全抑制。目前PD-1抗體單獨使用(yòng)的響應率僅30%左右,而小(xiǎo)鼠體内PD-1抗體加Fcγ受體阻斷劑卻對(duì)所有小(xiǎo)鼠産生響應，這(zhè)一發現(xiàn)無疑對(duì)目前免疫治療領域造成巨大(dà)影響，爲免疫治療不敏感癌症患者提供新的治療方案，讓癌症變得不再可怕。

更重要的是，功臣産品PNGaseF在AtaGenix的官網随時(shí)有售。點擊鏈接即可直達：

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