小(xiǎo)分子大(dà)作(zuò)用(yòng) ▏研發新動力，聚焦納米抗體

通過單克隆抗體技術制備的傳統單抗在長期用(yòng)于腫瘤或免疫類疾病的治療中會(huì)出現(xiàn)穿透力差、引起機體免疫排斥等缺點。1989年，比利時(shí)免疫學家Hamers-Casterman在分離駱駝血清的抗體時(shí)，偶然發現(xiàn)一種天然缺失輕鏈的重鏈抗體（HcAbs）可以很(hěn)好(hǎo)地解決上(shàng)述問題。

HcAbs重鏈抗體與納米抗體
從(cóng)結構上(shàng)看(kàn)，在駱科動物體内發現(xiàn)的重鏈抗體（HCAbs, Heavy-Chain Antibodies）包含一個重鏈可變區(qū)(VHH)、一個鉸鏈區(qū)和(hé)兩個常規的CH2和(hé)CH3區(qū)域，分子量約爲90kDa。

HCAbs結構示意圖

納米抗體(Nanobody，Nb)，即重鏈單域抗體VHH(variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody) ，該類抗體隻包含一個重鏈可變區(qū)（VHH）和(hé)CH2，CH3區(qū)，相比于其他(tā)抗體，輕鏈天然缺失。納米抗體晶體直徑2.5nm，長4nm，分子量一般在12-15KD，是自(zì)然存在的可以和(hé)抗原結合的最小(xiǎo)片段。

納米抗體VHH的表面大(dà)概隻有10個氨基酸與人VH的不同，在FR2中存在有四個特異的氨基酸：普通抗體FR2中V37、G44、L45和(hé)W47這(zhè)4個氨基酸殘基是在進化中相當保守的疏水(shuǐ)性殘基，而VHH中，這(zhè)四個突變爲親水(shuǐ)性的氨基酸殘基F37、E44、 R45、G47，增加了(le)VHH的水(shuǐ)溶性。利用(yòng)這(zhè)一特性，可将人源抗體VH的序列進行優化，對(duì)FR2中的一些(xiē)氨基酸進行VHH特征性改造，從(cóng)而使VH抗體的穩定性和(hé)溶解性更好(hǎo)，并且保持原有的特異性和(hé)親和(hé)力。

納米抗體因具備傳統抗體不具備的小(xiǎo)分子質量和(hé)強穿透性的優勢，被認爲在疾病診斷與治療、病原檢測、藥物殘留分析、環境監測等領域具有巨大(dà)的應用(yòng)潛力，在基因工(gōng)程與ADC藥物研發、體外(wài)診斷技術（膠體金(jīn)法、酶聯免疫吸附法、電化學發光法）、腫瘤及免疫學研究等方面也(yě)已取得一些(xiē)新的研究。

VHH在診斷方向的應用(yòng)

動物的選擇是免疫成功的關鍵，普健生物使用(yòng)目标抗原對(duì)健康強壯、精神良好(hǎo)、體型适中的羊駝進行四輪免疫後進行效價檢測，當血清免疫效價達到(dào)預期後，再提取總RNA用(yòng)于噬菌體文(wén)庫的構建，利用(yòng)噬菌體展示技術進行篩選得到(dào)高(gāo)特異性和(hé)強親和(hé)力的納米抗體。

 

普健生物構建了(le)千億級納米抗體VHH文(wén)庫，淘選了(le)針對(duì)新冠NTD domain的納米抗體，獲得了(le)9條VHH序列，并采用(yòng)哺乳系統進行了(le)9條VHH-Fc的重組表達，9條VHH-Fc序列的表達量均較高(gāo)。

9條VHH-Fc純化質檢圖(Reduced SDS-PAGE)

服務優勢
普健生物具有近千億級别的天然納米抗體庫，可提供天然納米抗體快(kuài)速篩選服務，最快(kuài)在2-3周内完成針對(duì)各類靶蛋白(bái)的特異性納米抗體快(kuài)速篩選，親和(hé)力達到(dào)10⁹M級别。
1.樣本豐富：源自(zì)百餘隻不同種類的駝類樣本--羊駝（Alpaca）、駱駝（Camel）、美(měi)洲駝（Llama），提供更高(gāo)的抗體多樣性。
2.庫容量大(dà)：總庫容近10¹¹cfu,未來(lái)将優化到(dào)超千億級别。
3.超高(gāo)品質：插入正确率100%，序列正确率97%，随機選取200個克隆測序，均無重複序列。
特定靶點的納米抗體定制服務
普健生物可以提供針對(duì)特定靶點的特異性納米抗體定制服務，包括抗原檢測，羊駝免疫，采血，效價檢測，納米抗體噬菌體庫構建及淘選，特異性高(gāo)親和(hé)力納米抗體篩選，表達，檢測一條龍服務。親和(hé)力可以達到(dào)10⁸~10¹⁰M級别。