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對(duì)單克隆抗體和(hé)多克隆抗體有一定的了(le)解後，我們又發現(xiàn)了(le)一個新的詞：抗體庫，也(yě)有稱之爲抗體文(wén)庫的。因爲在涉及噬菌體展示技術的時(shí)候，常常會(huì)提到(dào)一個詞：噬菌體展示文(wén)庫。以前一直不明(míng)天，爲什(shén)麽要這(zhè)麽表述。有鑒于此，今天普健生物就和(hé)大(dà)家一起學習學習。
首先，什(shén)麽是抗體庫?
顧名思義，抗體庫指的就是機體在受到(dào)抗原刺激後，産生的一系列特異性抗體的總和(hé)。簡單來(lái)說，就是某種抗原刺激機體後，會(huì)産生各類抗體，這(zhè)些(xiē)抗體的混合物則被稱爲抗體庫。
噬菌體抗體庫的構建流程爲何?
1、提取RNA。通過離心、震蕩、靜置等一系列的手段，提取無RNA酶的RNA;
2、反轉錄。将提取出來(lái)的RNA通過反轉錄的方式，獲得cDNA;
3、抗體片段擴增。通過反轉錄cDNA中擴增特定的抗體片段，對(duì)其進行片段擴增;
4、克隆到(dào)噬菌體上(shàng)。将擴增所得的多樣DNA進行抗體基因序列和(hé)噬菌體載體的酶切，将所需片段克隆到(dào)噬菌體質粒上(shàng);
5、轉化菌庫。通過對(duì)其連接産物進行電轉和(hé)培養後，獲得菌庫;
6、擴增并純化。将上(shàng)一步的菌體混合物進行培養後，通過相關操作(zuò)對(duì)其進行擴增和(hé)純化，最終獲得數量足夠的抗體庫;
當然了(le)，如上(shàng)我們也(yě)隻是和(hé)大(dà)家簡單聊了(le)一下(xià)大(dà)概的步驟，真是操作(zuò)的複雜(zá)程度非一兩句可以描述得了(le)的。如果您有興趣，可以在我們之前發布的文(wén)章“納米抗體之噬菌體文(wén)庫構建過程詳解”中進行詳細了(le)解。當然了(le)，如果您想要構建噬菌體抗體庫，您也(yě)可以直接聯系普健生物，我們擁有15年蛋白(bái)抗體制備經驗，爲您提供最優質的服務，歡迎您的來(lái)電咨詢。
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