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劃重點：
•雜(zá)交瘤技術是獲得單克隆抗體最常用(yòng)的技術。
•雜(zá)交瘤技術變體包括B細胞和(hé)立體特異性靶向協議(yì)。
•噬菌體展示技術和(hé)單B細胞技術是雜(zá)交瘤技術的替代方案。
單克隆抗體(mab)是一種通用(yòng)的高(gāo)度特異性結合蛋白(bái)，長期以來(lái)被認爲是對(duì)抗疾病的“魔彈”，也(yě)是診斷和(hé)研究等其他(tā)生物學用(yòng)途的重要工(gōng)具。這(zhè)些(xiē)應用(yòng)隻有在允許分離單個抗體的方法出現(xiàn)後才有可能(néng)。雜(zá)交瘤技術是這(zhè)方面的先驅。事(shì)實上(shàng)，這(zhè)項技術徹底改變了(le)治療和(hé)研究領域，1984年諾貝爾生理(lǐ)學或醫(yī)學獎進一步認可了(le)這(zhè)一點。那麽雜(zá)交瘤技術随着時(shí)間的推移發展，與其他(tā)方法相比，雜(zá)交瘤技術又有哪些(xiē)優勢和(hé)局限性呢(ne)？
雜(zá)交瘤技術由Georges Köhler和(hé)Cesar Milstein于1975年基于用(yòng)所需抗原免疫動物，然後将特異性B淋巴細胞與“不朽”骨髓瘤細胞融合，然後被克隆以獲得穩定的單克隆細胞系，在選擇感興趣的抗體分泌克隆後，将細胞轉移到(dào)大(dà)規模培養裝置中，以産生所需數量的抗體。
自(zì)引入雜(zá)交瘤技術以來(lái)，單克隆抗體對(duì)醫(yī)學産生了(le)深遠的影響，提供了(le)幾乎更多的診斷和(hé)研究試劑來(lái)源。鑒于單克隆抗體的通用(yòng)性和(hé)實用(yòng)性，雜(zá)交瘤技術帶來(lái)了(le)許多發現(xiàn)，允許産生針對(duì)抗原的抗體，甚至針對(duì)同一抗原的不同抗體。但(dàn)雜(zá)交瘤技術也(yě)有其局限性，因此，科學家們在雜(zá)交瘤技術的基礎上(shàng)，還發現(xiàn)了(le)噬菌體展示技術和(hé)單B細胞技術。
雜(zá)交瘤技術
優點：
保留了(le)可變區(qū)和(hé)恒定區(qū)基因組合的原生配對(duì)。
抗體嵌合和(hé)人源化方法以及轉基因動物可用(yòng)于獲得用(yòng)于人類治療的單克隆抗體。
抗體在體内親和(hé)成熟。
缺點：
需要已知(zhī)和(hé)可用(yòng)的抗原靶點。
細胞融合和(hé)雜(zá)交瘤分離效率低(dī)。
細胞系的産生和(hé)特異性雜(zá)交瘤的選擇需要相對(duì)較長的時(shí)間。
雜(zá)交瘤細胞系可能(néng)在遺傳上(shàng)不穩定。
細胞培養物污染的持續風(fēng)險。
噬菌體展示技術
優點：
不需要動物宿主。
大(dà)量克隆的篩選增加了(le)産生良好(hǎo)單克隆抗體的機會(huì)。
分離抗毒性和(hé)非免疫原性抗原的單克隆抗體的潛力。
重新設計(jì)天然cdr以産生特異性和(hé)親和(hé)力更高(gāo)的單克隆抗體的可能(néng)性。
龐大(dà)的展示文(wén)庫數據來(lái)源。
缺點：
噬菌體文(wén)庫的多樣性取決于細菌轉化效率。
抗體格式僅限于scFv和(hé)Fab。
建立噬菌體展示文(wén)庫成本高(gāo)昂。
單個B細胞技術
優點：
與雜(zá)交瘤技術相比，獲得特異性單克隆抗體的效率更高(gāo)。
從(cóng)接種疫苗或自(zì)然免疫的人類受試者中分離單克隆抗體的可能(néng)性。
原生單克隆抗體的分離，并保留天然同源VH和(hé)VL配對(duì)。
不需要B細胞培養過程。
具有分離抗體外(wài)難以模拟的構象決定簇的功能(néng)性單克隆抗體的潛力。
可以區(qū)分處于不同發育和(hé)分化階段的B細胞。
在實驗研究中，B細胞可以從(cóng)多個樣本中分離出來(lái)，而不需要對(duì)動物實施安樂死。
抗體在體内經曆親和(hé)成熟。
缺點：
單細胞分選設備價格昂貴。
RT-PCR程序可能(néng)具有挑戰性。
針對(duì)B細胞标記物的抗體并非适用(yòng)于所有物種。
