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噬菌體抗體文(wén)庫和(hé)噬菌體抗體庫的多樣性

發表時(shí)間:2023-08-30 訪問次數:246

癌症等疾病的流行以及對(duì)免疫療法需求的增加正在推動針對(duì)緻病細胞和(hé)生物體的技術的發展。這(zhè)導緻了(le)所謂的抗體庫的發展。從(cóng)曆史上(shàng)看(kàn),開(kāi)發預防疾病的疫苗和(hé)治療方法的主要方法是從(cóng)感染後幸存下(xià)來(lái)的人身上(shàng)收集抗體。免疫細胞需要分離,并且必須篩選大(dà)量抗體,以找到(dào)與特定病原體結合最緊密的抗體。然而,這(zhè)可能(néng)很(hěn)耗時(shí),有時(shí)時(shí)間至關重要——COVID-19大(dà)流行一直提醒着我們。

 

顧名思義,抗體庫是現(xiàn)有抗體的文(wén)庫,可以搜索這(zhè)些(xiē)庫以提供可能(néng)對(duì)病原體有效的抗體。通過采用(yòng)這(zhè)種方法,可以大(dà)大(dà)加快(kuài)藥物發現(xiàn)過程。通過從(cóng)幾百人那裏收集樣本,抗體庫中可以存儲許多倍的人類抗體。

 

抗體庫是衍生抗體的重要資源,可用(yòng)于廣泛的應用(yòng),從(cóng)結構和(hé)功能(néng)研究到(dào)細胞内蛋白(bái)質幹擾研究,再到(dào)開(kāi)發新的診斷和(hé)治療方法。無論目标是什(shén)麽,抗體庫的關鍵參數是其複雜(zá)性(也(yě)稱爲多樣性),即集合中不同元素的數量,這(zhè)直接反映了(le)在庫中發現(xiàn)針對(duì)給定抗原的抗體的概率,具有足夠高(gāo)的親和(hé)力。由于抗體庫序列的高(gāo)度相似性和(hé)長度,長期以來(lái),抗體庫複雜(zá)性和(hé)質量的定量評估一直沒有得到(dào)充分解決。複雜(zá)性通常由轉化效率推斷,并通過指紋識别和(hé)/或對(duì)幾百個随機文(wén)庫元素的測序進行測試。

 

抗體庫中常用(yòng)的一種技術是噬菌體展示,其中表面帶有抗體的基因操縱噬菌體與固定化抗原結合。洗滌後,任何剩餘的噬菌體都會(huì)顯示感興趣的抗體。然後可以将這(zhè)些(xiē)插入大(dà)腸杆菌中以擴增抗體以進行進一步研究。

 

目前世界上(shàng)有很(hěn)多的全人源抗體庫,可以分爲天然抗體庫,半合成抗體庫和(hé)合成抗體庫,不過大(dà)部分抗體文(wén)庫都存在着供體少、庫容低(dī)、多樣性差、親和(hé)力弱、錯配率高(gāo)等問題,普健生物構建了(le)千億級别、高(gāo)親和(hé)力全人源重組天然抗體文(wén)庫,經過驗證,任意靶點從(cóng)文(wén)庫中直接篩選,一般可以獲得十幾個到(dào)上(shàng)百個高(gāo)親和(hé)力的克隆,其親和(hé)力、特異性都達到(dào)行業領先水(shuǐ)平

普健生物擁有領先的噬菌體技術平台,利用(yòng)噬菌體展示技術,普健生物提供構建噬菌體展示抗體文(wén)庫、噬菌體展示多肽文(wén)庫、抗原表位篩選、抗體親和(hé)力成熟等技術服務。同時(shí)普健生物具有鼠源天然抗體文(wén)庫、兔源天然抗體文(wén)庫、納米抗體天然抗體文(wén)庫、重組全人源噬菌體抗體文(wén)庫等。

 

普健生物千億級全人重組抗體庫優勢:

1.序列正确性高(gāo),現(xiàn)階段庫容已達近千億級别(1011pfu)

2.兩步法建庫,先連入輕鏈再連入重鏈,将來(lái)自(zì)全世界不同地區(qū)人種來(lái)源的輕鏈和(hé)重鏈随機組合,保證了(le)庫的高(gāo)

質量和(hé)多樣性。

3.分爲κ和(hé)λ兩種輕鏈亞型的單鏈抗體庫,與大(dà)多數商業化混合庫不同,即可用(yòng)于篩選κ型抗體,也(yě)可用(yòng)于篩

λ型的高(gāo)親和(hé)力抗體。

4.帶有His标簽,可直接用(yòng)phagemid表達抗體,His标簽純化。

QC檢測:

1.總插入率及正确率

片段插入率100%,抗體序列正确率>90%

2.抗體序列多樣性分析

種系基因(Germline)分析:種系基因主要指單倍體生殖細胞和(hé)幹細胞中所含有,未發生重排的全部基因。抗體

庫一般隻分析抗體序列裏面V基因的種系分布。

互補決定區(qū)(CDR)分析:抗體分子可分爲恒定區(qū)和(hé)可變區(qū)兩部分。在可變區(qū)内有一小(xiǎo)部分氨基酸殘基變化特别強烈,

這(zhè)個區(qū)域稱高(gāo)變區(qū)(HVR)。在L鏈、H鏈的V區(qū)中有三個高(gāo)變區(qū),該部位因在空(kōng)間結構上(shàng)可與抗原決定簇形成精密的互補,

又稱互補性決定區(qū)。

我們的優勢

豐富的噬菌體抗體技術經驗,五年以上(shàng)噬菌體抗體開(kāi)發,交付上(shàng)百個噬菌體展示抗體開(kāi)發項目

具有全人源重組抗體庫,庫容高(gāo)達千億級别(1011pfu),兩步建庫法,保證了(le)文(wén)庫的多樣性,抗體庫片段插入;正确率高(gāo);可以兩周拿到(dào)全人源重組抗體

可以構建多物種(人源、小(xiǎo)鼠、兔子、羊駝等)抗體文(wén)庫

可以構建多種類型(scfvFabVHH等)的抗體文(wén)庫

 

研究人員越來(lái)越多地使用(yòng)抗體庫來(lái)尋找新的藥物靶點、抗體、疾病的生物标志物等。随着更多抗體的發現(xiàn)和(hé)更多的組合被納入其中,新藥和(hé)疫苗的開(kāi)發将繼續顯示出改進。