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納米抗體作(zuò)爲診斷工(gōng)具的臨床應用(yòng)—— 用(yòng)于病原體感染診斷

發表時(shí)間:2023-09-26 訪問次數:231

納米抗體在病原菌引起的感染診斷方面的突出表現(xiàn),可以爲疾病的早期診斷提供便捷,幫助我們快(kuài)速控制疾病的惡化并達到(dào)治療的目的。

牛結核病是一種主要由于感染結核分枝杆菌發病且死亡率極高(gāo)的慢性人畜共患傳染病,研究發現(xiàn)牛結核分枝杆菌表達多個分泌蛋白(bái),其中Ag85B是牛結核分枝杆菌主要的分泌蛋白(bái)之一目前已有研究已經成功構建了(le)抗牛結核分枝杆菌VHH抗體庫,且以Ag85B蛋白(bái)爲抗原,采用(yòng)噬菌體展示技術經淘選并富集及蛋白(bái)芯片互作(zuò)技術篩選得到(dào)抗Ag85BVHH抗體,爲牛結核病的診斷和(hé)治療奠定基礎。
沙門(mén)氏菌引發的食物中毒占據食物中毒首列,He等在對(duì)免疫駱駝納米抗體庫進行生物淘選後,首次分離出了(le)針對(duì)腸炎沙門(mén)氏菌的納米抗體,将C端含有6×His标簽标記的3個納米抗體的質粒亞克隆到(dào)大(dà)腸杆菌Top10F′中,通過異丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl β-d-thiogalactoside, IPTG) 誘導過夜表達,并用(yòng)Ni-NTA親和(hé)柱進行純化,最後開(kāi)發了(le)一種基于Nb 13的夾心ELISA法用(yòng)于牛奶樣品中的腸炎沙門(mén)氏菌檢測,檢測限可達1.4×105 CFU/mL
錐蟲病是一種由寄生蟲引起的睡眠病。Pinto等通過質譜選擇後鑒定出一對(duì)特異性針對(duì)錐蟲丙酮酸激酶(TcoPYK) Nb對(duì)(Nb44/Nb42),并建立了(le)兩種異源夾心試驗法:側向流動側流法(LFAs) 和(hé)ELISA法用(yòng)于檢測感染小(xiǎo)鼠和(hé)牛血漿樣本中的寄生蟲病,測定LOD分别爲220 ng/mL和(hé)14 ng/mLLFAs展示出了(le)良好(hǎo)的特異性(92%)
此前,2010年在中國首次報(bào)道(dào)的蜱傳病毒發熱伴血小(xiǎo)闆減少綜合征布尼亞病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus, SFTSV) 可導緻人患發熱伴血小(xiǎo)闆減少綜合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome, SFTS)。吳喜林(lín)等通過篩選SFTS獲得特異性結合SFTSV表面糖蛋白(bái)(glycoprotein, GN) 的納米抗體VHH,鑒定CDR序列并構建了(le)人源化的VHH-HUFC1 (SNB抗體),通過試驗表明(míng)SNB抗體可應用(yòng)于SFTSV的檢測試劑盒的研發,即納米抗體雙抗體夾心ELISA檢測sGN蛋白(bái)從(cóng)而檢出SFTSV病毒,其中SNB01SNB37的雙抗組合檢測SFTSV真病毒的靈敏度爲3.75×106 gc/mL

納米抗體作(zuò)爲一種可塑性強、較爲新穎的抗原識别和(hé)調控的工(gōng)具,具備小(xiǎo)尺寸、易表達和(hé)篩選及改造、高(gāo)親性和(hé)穩定性等優勢,能(néng)夠識别傳統抗體難以識别的較爲隐匿的抗原表位,在診斷治療各種疾病及檢測方面的應用(yòng)不斷深入,且在基礎研究中也(yě)發揮着不可替代的作(zuò)用(yòng)。


普健生物納米抗體主要通過免疫羊駝由羊駝體内自(zì)身的抗體成熟階段來(lái)得到(dào)抗體基因,然後通過噬菌體展示篩選技術來(lái)從(cóng)羊駝抗體庫中篩選得到(dào)最适合的抗體序列。普健生物一站(zhàn)式抗體發現(xiàn)整體解決方案可爲您提供完善的納米抗體定制服務,從(cóng)抗原制備、羊駝免疫、噬菌體文(wén)庫構建、噬菌體文(wén)庫淘選、表達純化到(dào)抗體生産、親和(hé)力排序,爲您交付高(gāo)标準的噬菌體免疫文(wén)庫、陽性菌株、VHH序列及技術服務報(bào)告等内容。如果您近期有納米抗體定制相關需求,歡迎撥打服務咨詢熱線027-87001869,我們将竭誠爲您服務!
我們的優勢:
自(zì)建養殖基地:每年近百頭成年羊駝用(yòng)于免疫,穩定提供大(dà)量的免疫抗原
庫容大(dà):近千億級别天然庫
淘選周期短:最快(kuài)在2周内可完成針對(duì)各類靶點的特異性納米抗體快(kuài)速篩選
親和(hé)力高(gāo):抗體親和(hé)力可達10-9M 級别
樣本來(lái)源豐富:免疫庫源自(zì)百餘隻不同種類的駝類樣本-羊駝(Alpaca )、駱駝(Camel)、美(měi)洲駝(Llama),提供更高(gāo)抗體多樣性
超高(gāo)品質:插入正确率100%,序列正确率97%,随機選取200個克隆測序,均無重複序列
可構建免疫庫,獲得更高(gāo)親和(hé)力VHH序列


參考文(wén)獻:
SUN S, TAN X, PANG XY, LI M, HAO XJ. Recent advances in the application of nanobody technology: a review. Chinese Journal of Biotechnology, 2022, 38(3): 855-867.