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肌紅(hóng)蛋白(bái)（Mb）是一種微小(xiǎo)的單體蛋白(bái)，其重量僅爲17.8kDa，主要在脊椎動物的心髒和(hé)骨骼肌中表達。它具有結合、儲存和(hé)運輸氧到(dào)線粒體的關鍵作(zuò)用(yòng)。之前的研究已經發現(xiàn)，在心肌中，每克組織濕重中的Mb含量大(dà)約爲2.5mg，而在骨骼肌中這(zhè)個數值約爲4.0mg。
Mb由珠蛋白(bái)（α-珠蛋白(bái)鏈和(hé)β-珠蛋白(bái)鏈）和(hé)血紅(hóng)素基團共同組成，它通常存在于脊椎動物的橫紋肌和(hé)心肌中。然而，如果大(dà)量的Mb出現(xiàn)在血液、尿液或腎髒等器官中，這(zhè)将是非常危險的，因爲它可能(néng)引發一種可能(néng)危及生命的綜合征——橫紋肌溶解症（RM）綜合征。橫紋肌溶解症（RM）是骨骼肌受損和(hé)細胞内分解産物（主要包括Mb）釋放(fàng)到(dào)血液循環中。 橫紋肌溶解的誘因多種多樣，包括擠壓傷、創傷、某些(xiē)感染、藥物、酒精和(hé)毒素。在這(zhè)些(xiē)因素中，Mb起着關鍵的作(zuò)用(yòng)，是橫紋肌溶解病理(lǐ)生理(lǐ)學的重要組成部分。Mb是骨骼肌的主要成分，但(dàn)當它釋放(fàng)到(dào)血液中時(shí)，可能(néng)會(huì)引發急性腎損傷（AKI），這(zhè)是嚴重橫紋肌溶解的危險并發症。
目前的研究已經明(míng)确，Mb通過三種機制引起急性腎損傷（AKI）：第一種機制是腎小(xiǎo)管堵塞，這(zhè)是由Mb的毒性所導緻的；其次，氧化損傷是由Mb中的鐵(tiě)解離和(hé)自(zì)由基的釋放(fàng)引起的；最後一種機制是由于Mb引起的脂質過氧化。
在診斷和(hé)基礎研究中，抗體發揮着重要的作(zuò)用(yòng)。對(duì)于心肌梗死或橫紋肌溶解的檢測，Mb的實驗室檢查是最爲重要在的患一這(zhè)項發生指标。在實驗動物的基礎研究中，RM-AKI或擠壓綜合征-AKI（CS-AKI）仍然是是腎損傷的關鍵生物标志物。
Mb的抗體檢測取決于抗體的特異性和(hé)親和(hé)力，單克隆抗體正是針對(duì)具有高(gāo)純度和(hé)強特異性優勢的特定表位進行研發的。它已被廣泛應用(yòng)于各種生物醫(yī)學科學領域，并促進了(le)許多學科的發展。特别是重組兔單克隆抗體，它具有諸多優勢，包括更好(hǎo)的特異性和(hé)靈敏度、高(gāo)批次間一緻性和(hé)可重複性、無動物源性制劑、長期供應安全，以及由于更大(dà)的兔免疫庫，對(duì)不同靶标具有更廣泛的免疫反應性。目前已經有針對(duì)人Mb的重組兔單克隆抗體成功制備并商業化，用(yòng)于實驗室室研究。不幸的是，迄今爲止，尚未報(bào)道(dào)用(yòng)于大(dà)鼠Mb免疫原的重組兔抗Mb單克隆抗體具有高(gāo)親和(hé)力、廣泛的物種反應性和(hé)多方面的應用(yòng)。
爲此，研究人員通過外(wài)源性大(dà)鼠Mb基因真核表達、動物免疫、雜(zá)交瘤篩選、重鏈和(hé)輕鏈基因測序及瞬時(shí)轉染質量比優化、重組抗體表達純化等技術制備的新型重組兔抗大(dà)鼠Mb單克隆抗體。具有極高(gāo)親和(hé)力（KD= 1.21 pM），廣泛的物種反應性（小(xiǎo)鼠，大(dà)鼠，人和(hé)馬）和(hé)良好(hǎo)的組織特異性（骨骼肌和(hé)心肌）。應用(yòng)重組兔抗Mb單克隆抗體通過蛋白(bái)質印迹（WB），免疫組織化學和(hé)免疫熒光診斷RM-AKI疾病的腎髒，心肌，骨骼肌組織和(hé)血液中的Mb沉積。這(zhè)項研究揭示了(le)新型單克隆抗體在RM相關疾病的潛在應用(yòng)。
雜(zá)交瘤技術是抗體發現(xiàn)主要途徑之一，在科研抗體開(kāi)發和(hé)抗體藥物發現(xiàn)中都扮演着重要角色。雜(zá)交瘤細胞既能(néng)無限增殖又能(néng)産生特異性抗體，可用(yòng)來(lái)制備高(gāo)純度、污染少、可重複的單克隆抗體。普健生物作(zuò)爲武漢國家生物産業基地指定的光谷抗體發現(xiàn)與篩選公共服務平台，提供優質的雜(zá)交瘤細胞開(kāi)發服務，提供多種抗原免疫方式，經融合、篩選、檢測，最終得到(dào)高(gāo)質量的雜(zá)交瘤細胞。
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案例展示
