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利用(yòng)噬菌體展示技術挖掘兔抗體庫中具有治療作(zuò)用(yòng)的單克隆抗體

發表時(shí)間:2023-11-07 訪問次數:249

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近年來(lái)抗體在檢測、診斷、治療等方面發揮了(le)越來(lái)越重要的作(zuò)用(yòng)。兔單克隆抗體具有比鼠源抗體活性更好(hǎo)且靈敏度更高(gāo)、比人源抗體更易獲得等優點。構建免疫噬菌體展示抗體庫是目前獲得兔源單克隆抗體庫比較常用(yòng)的方法。


兔抗體庫以多克隆抗體(polyclonal antibody, pAbs)的形式被廣泛應用(yòng)于免疫組織化學(immunohistochemistry, IHC)、蛋白(bái)質印迹法(Western blot)、酶聯免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和(hé)流式細胞術等免疫學研究領域,是獲得高(gāo)親和(hé)力和(hé)特異性抗體的重要來(lái)源。人類和(hé)小(xiǎo)鼠在VH-D-JH(重鏈)和(hé)VL-JL(輕鏈)基因重排後幾乎完全依賴體細胞超突變來(lái)進一步多樣化抗體基因,而兔的V-(D)- J重組之後是體細胞基因轉換和(hé)體細胞超突變,以擴展一組和(hé)二組抗體庫。此外(wài),家兔(Oryctolagus cuuniculus)屬于兔形目(Lagomorpha),與齧齒類(Rodentia)的分類學目小(xiǎo)鼠、大(dà)鼠等齧齒類動物在進化上(shàng)距離較遠。衆所周知(zhī),抗原的來(lái)源與免疫動物之間種系關系越遠,其抗原免疫原性越強,越易産生免疫應答(dá);反之,種系關系越近,則抗原免疫原性越弱因此,由于免疫耐受,鼠和(hé)人單克隆抗體(mAbs)無法識别的鼠和(hé)人抗原之間保守的表位往往可以被兔單克隆抗體(mAbs)識别。然而,大(dà)規模使用(yòng)多克隆抗體的可行性受到(dào)一些(xiē)因素的限制,例如在工(gōng)業上(shàng)穩定地複制的挑戰通過噬菌體展示或雜(zá)交瘤技術産生兔單克隆抗體的能(néng)力克服了(le)這(zhè)一限制。

噬菌體展示技術産生的兔單克隆抗體具有表型和(hé)基因型同時(shí)被選擇的優點。對(duì)兔單克隆抗體(mAb)序列的分析使我們能(néng)夠制備多種格式單克隆抗體(mAb),包括scFv, Fab, scFv- fc和(hé)IgG,更重要的是,可以進行人源化和(hé)親和(hé)成熟。因此,通過噬菌體展示技術制備的兔單抗已成爲一種有前景的人類診斷和(hé)治療試劑。研究人員利用(yòng)遺傳多樣性的naïve家兔骨髓和(hé)脾髒的逆轉錄mRNA和(hé)一組用(yòng)于PCR擴增輕鏈和(hé)重鏈的寡核苷酸,建立了(le)包含> 100億家兔單抗的噬菌體展示文(wén)庫,并通過二代測序(NGS)進行驗證。

利用(yòng)噬菌體展示技術,普健生物提供構建噬菌體展示抗體文(wén)庫、噬菌體展示多肽文(wén)庫、抗原表位篩選、抗體親和(hé)力成熟等技術服務。同時(shí)普健生物具有鼠源天然抗體文(wén)庫、兔源天然抗體文(wén)庫、納米抗體天然抗體文(wén)庫、重組全人源噬菌體抗體文(wén)庫等。

服務優勢
1. 豐富的噬菌體抗體技術經驗,五年以上(shàng)噬菌體抗體開(kāi)發,交付上(shàng)百個噬菌體展示抗體開(kāi)發項目
2. 具有全人源重組抗體庫,庫容高(gāo)達千億級别(1011 pfu),兩步建庫法,保證了(le)文(wén)庫的多樣性,抗體庫片段插入
正确率高(gāo);可以兩周拿到(dào)全人源重組抗體
3. 可以構建多物種(人源、小(xiǎo)鼠、兔子、羊駝等)抗體文(wén)庫
4. 可以構建多種類型(scfvFabVHH 等)的抗體文(wén)庫


參考文(wén)獻
Haiyong Peng,Mining Naïve Rabbit Antibody Repertoires by Phage Display for Monoclonal Antibodies of Therapeutic Utility,Journal of Molecular Biology,Volume 429, Issue 19, 15 September 2017, Pages 2954-2973