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單克隆抗體制備是一項精細且複雜(zá)的工(gōng)作(zuò)，需要通過一系列的手段才能(néng)實現(xiàn)抗體的制備。而且随着技術的不斷發展，單克隆抗體從(cóng)雜(zá)交瘤技術發展到(dào)現(xiàn)階段使用(yòng)最爲廣泛的單B細胞技術。
單B細胞技術其實就是通過分離單個B細胞，通過對(duì)其進行克隆培養，結合多種PCR技術形成的一種體外(wài)篩選及表達體系。使用(yòng)單B細胞技術制備的單克隆抗體具有高(gāo)通量、高(gāo)效率、低(dī)細胞數等優點，是現(xiàn)如今最近、最高(gāo)效的抗體篩選方法之一。
單B細胞技術制備流程：
1、鑒定和(hé)分離單個B細胞
單B細胞分離通常有兩種：随機分離和(hé)抗原特異性分離。通過多次免疫兔子，檢驗血清中抗體含量及質量，而後從(cóng)中分離出B細胞;
2、擴增和(hé)克隆抗體基因
進行細胞分選時(shí)，需要将B細胞注入到(dào)合适的培養液中，然後對(duì)其進行RNA提取并進行逆轉錄;
3、重組抗體表達
對(duì)所得DNA進行目的基因表達，獲得相應的目标抗體;
4、抗體鑒定
将所得抗體進行純化(可采用(yòng)親和(hé)層析法或離子交換層析法進行純化)，而後對(duì)抗體的特異性和(hé)生物活性進行鑒定;
5、大(dà)規模生産
測定所得目的抗體特異性和(hé)生物活性達到(dào)我們要求後，開(kāi)始進行大(dà)規模生産;
單B細胞技術制備的單克隆抗體的優勢：
1、高(gāo)特異性。和(hé)其他(tā)動物相比，兔免疫系統更加優秀，所得抗體特異性更強;
2、高(gāo)穩定性。兔單克隆抗體穩定性更高(gāo);
3、高(gāo)親和(hé)力。兔B細胞的親和(hé)力是其他(tā)動物的10-100倍;
當然了(le)，單B細胞兔單克隆抗體制備技術雖然具備着其他(tā)抗體表達系統所不具備的優勢，但(dàn)是，它需要的技術水(shuǐ)平更高(gāo)，相關制備成本也(yě)更高(gāo)一些(xiē)。總的來(lái)說，隻有具備相應技術實力的公司才能(néng)采用(yòng)單B細胞技術制備抗體。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供兔單克隆抗體制備服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
