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盤點SPR親和(hé)力檢測時(shí)常見的幾大(dà)問題

發表時(shí)間:2024-02-29 訪問次數:305

  SPR(Surface plasmon resonance)也(yě)被稱爲表面等離子體共振,就本質上(shàng)來(lái)說,是一種物理(lǐ)光學現(xiàn)象。SPR技術可用(yòng)于進行分子間特異性結合的分析、濃度定量、結合動力學、親和(hé)力分析等,使用(yòng)範圍非常的廣泛。

SPR兔單克隆抗體

  在SPR親和(hé)力檢測時(shí),有很(hěn)多問題需要引起注意,這(zhè)樣才能(néng)在更大(dà)程度上(shàng)保障實驗的精準。下(xià)面,普健生物和(hé)大(dà)家盤點這(zhè)些(xiē)問題。

  1、如果爲病毒樣本,需要進行儀器消毒嗎?

  無論使用(yòng)的是不是病毒樣本,在每次檢測完成後,都需要對(duì)一起進行清洗,清除管道(dào)中殘留的樣品,盡可能(néng)清洗除菌,以防止管道(dào)中微生物可能(néng)對(duì)儀器造成的損壞;

  2、進行親和(hé)力分析的時(shí)候,一般選擇哪種緩沖液?

  親和(hé)力檢測時(shí)我們通常采用(yòng)的緩沖液爲PBS或HBS。當然了(le),對(duì)于一些(xiē)特殊的檢測需求來(lái)說,需要搭配特定的緩沖液;

  3、如果樣本爲小(xiǎo)分子化合物,可以做親和(hé)力檢測嗎?

  小(xiǎo)分子化合物(ATAGENIX)一般來(lái)說可以做親和(hé)力檢測,但(dàn)是常常需要根據小(xiǎo)分子本身的溶解性來(lái)進行判斷,如果溶解度低(dī),需要加入DMSO來(lái)促進溶解;

  4、檢測過程中出現(xiàn)非特異性結合,需要如何解決?

  當抗原和(hé)抗體發生非特異性結合時(shí),我們需要對(duì)樣品離心後放(fàng)棄上(shàng)清液,加入PBS清洗三次後,過濾掉聚集的細胞,而後加入醋酸鈉,并将其稀釋到(dào)合适的細胞密度;

  5、如何進行表位分析?

  選擇配對(duì)檢測,通過在芯片表面固定一種抗體,并将抗原結合到(dào)抗體上(shàng),在其經過第二種抗體時(shí),看(kàn)其是否能(néng)夠結合到(dào)抗原上(shàng);

  6、SPR和(hé)BLI的優缺點各有哪些(xiē)?

  SPR和(hé)BLI在親和(hé)力檢測中各具優勢,兩種方法都可以獲得精準的數值和(hé)相關動力學數據。當然了(le),SPR比BLI擁有更長的曆史,在靈敏度上(shàng)更具優勢,在分辨方面更勝一籌。隻是SPR需要更多的儀器維護,且實驗樣品不可回收;

  親和(hé)力檢測作(zuò)爲現(xiàn)階段常用(yòng)的親和(hé)力檢測手段,無論在理(lǐ)論研究和(hé)還是臨床實驗上(shàng),都有着廣泛的應用(yòng)。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供SPR親和(hé)力檢測服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。