重組蛋白(bái)表達在現(xiàn)代生命科學研究中起着至關重要的作(zuò)用(yòng),通過DNA重組技術來(lái)産生所需目的蛋白(bái)的方式。而對(duì)于重組蛋白(bái)表達來(lái)說,表達載體是基因表達所需的必要元素,比如啓動子、序列、終止密碼子、轉錄終止序列等。就目前來(lái)說,有多種表達系統選擇,比如大(dà)腸杆菌、昆蟲細胞、哺乳動物、枯草芽孢杆菌以及酵母表達系統,需要結合不同情況來(lái)選擇載體。
那麽,我們具體通過哪些(xiē)因素來(lái)選擇表達載體呢(ne)?
1、表達系統
對(duì)于不同表達系統來(lái)說,其選擇的載體是各不相同的,所以,需要結合不同的系統來(lái)選擇合适的載體;
2、載體大(dà)小(xiǎo)
一般這(zhè)個時(shí)候,我們需要結合DNA片段是大(dà)還是小(xiǎo),爲了(le)操作(zuò)方便,我們一般采用(yòng)載體相對(duì)較小(xiǎo)的分子,這(zhè)樣所得的蛋白(bái)更穩定;
3、蛋白(bái)标簽
蛋白(bái)标簽我們一般選擇較短的肽段,隻有有了(le)這(zhè)類标簽,對(duì)于那些(xiē)缺乏檢測方法的蛋白(bái)來(lái)說,能(néng)夠輕松實現(xiàn)檢測;
4、蛋白(bái)應用(yòng)
根據目标蛋白(bái)的下(xià)遊應用(yòng),表達載體可以搭配一些(xiē)标簽使用(yòng),這(zhè)些(xiē)特定的标簽有助于研究目的蛋白(bái)的特性,以及蛋白(bái)之間的相互作(zuò)用(yòng);
5、啓動子
啓動子的類型有很(hěn)多,它在很(hěn)大(dà)情況下(xià)制約着蛋白(bái)的表達。所以,無論是原核表達還是真核表達,我們都需要結合蛋白(bái)的特性及使用(yòng)目的來(lái)挑選合适的啓動子,這(zhè)樣才能(néng)更好(hǎo)地進行蛋白(bái)的表達;
6、标記選擇
标記其實就是一種基因,她(tā)可以爲目的蛋白(bái)添加一種适合人工(gōng)選擇的性狀。這(zhè)種标記多選擇康生物基因,主要目的是方便後期的陽性克隆篩選;
重組蛋白(bái)表達的作(zuò)用(yòng)不僅于此,其使用(yòng)範圍非常的廣泛,當然了(le),對(duì)于不同的表達環境來(lái)說,需要結合不同的表達載體來(lái)進行表達。在重組蛋白(bái)表達的過程中,有很(hěn)多細節問題需要注意,這(zhè)樣才能(néng)更好(hǎo)地實現(xiàn)表達。更多重組蛋白(bái)表達,敬請(qǐng)關注普健生物。