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細胞轉染實驗可以說是生物實驗中的一道(dào)難關，做得好(hǎo)的話(huà)，可以大(dà)大(dà)降低(dī)實驗難度;如果轉染率低(dī)，那麽，再昂貴的細胞也(yě)隻能(néng)報(bào)廢。有鑒于此，普健生物今天在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家具體聊聊有關細胞轉染的那些(xiē)事(shì)。
一般來(lái)說，我們可以通過三個途徑來(lái)進行細胞轉染：物理(lǐ)介導、化學介導和(hé)生物介導。
物理(lǐ)介導：直接通過電穿孔、顯微注射、基因槍等工(gōng)具，将基因注入到(dào)細胞内部的方式;
化學介導：相對(duì)來(lái)說，化學介導的方法要多一些(xiē)，比如通過磷酸鈣共沉澱法、脂質體轉染法等;
生物介導：一般采用(yòng)病毒介導轉染技術來(lái)實現(xiàn);
對(duì)于細胞轉染來(lái)說，需要轉染效率高(gāo)一級細胞毒性小(xiǎo)等特點。所以，随着技術的發展，病毒介導的方式使用(yòng)的越來(lái)越多，因爲它能(néng)同時(shí)滿足如上(shàng)的兩種需求。隻不過，這(zhè)種方法需要的技術水(shuǐ)平較高(gāo)，一般實驗室較難達到(dào)要求。
常用(yòng)的轉染技術有哪些(xiē)?
就現(xiàn)在而言，常用(yòng)的轉染技術主要有兩種：瞬時(shí)轉染和(hé)穩定轉染。
瞬時(shí)轉染(transient transfection)：不會(huì)将外(wài)源的DNA/RNA整合到(dào)宿主染色體上(shàng)，而且一個宿主細胞可以存在多個拷貝數，一般來(lái)說生産水(shuǐ)平非常的高(gāo)，但(dàn)是持續時(shí)間要短很(hěn)多(通常隻能(néng)持續2-3天);
穩定轉染(Stable transfected)：會(huì)将外(wài)源DNA/RNA整合到(dào)宿主染色體上(shàng)(也(yě)可能(néng)作(zuò)爲遊離體)。外(wài)源DNA在染色體中的表達量低(dī);
對(duì)于瞬時(shí)轉染和(hé)穩定轉染來(lái)說，不存在那個方法更好(hǎo)的說法，隻是說，在不同實驗需求中，哪個方法更加合适。對(duì)于那些(xiē)理(lǐ)想的既能(néng)保證高(gāo)轉染率，又能(néng)低(dī)細胞毒素的情況，幾乎不能(néng)能(néng)完全實現(xiàn)。隻有最合适的方法，沒有最完美(měi)的方法。更多細胞轉染知(zhī)識，敬請(qǐng)關注武漢普健生物。
