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細胞轉染技術在蛋白(bái)抗體制備的一種常用(yòng)方法，而且随着技術的不斷發展，細胞轉染已經成爲研究和(hé)控制真核細胞基因功能(néng)的常用(yòng)工(gōng)具。而且在基因功能(néng)、基因調控等方面有着廣泛的使用(yòng)。那麽，具體什(shén)麽是細胞轉染技術?它的原理(lǐ)和(hé)特點都有哪些(xiē)呢(ne)?今天普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊。
什(shén)麽是細胞轉染技術?
所謂的細胞轉染，其實就是将外(wài)源分子導入到(dào)真核細胞内，通過這(zhè)些(xiē)外(wài)源細胞來(lái)該表真核細胞内蛋白(bái)表達能(néng)力的一種技術。
使用(yòng)細胞轉染技術的目的是什(shén)麽?
細胞轉染的主要目的就是研究基因的功能(néng)和(hé)基因的産物，對(duì)細胞中的一些(xiē)表達進行抑制或增強，控制細胞内蛋白(bái)産生。
轉染爲什(shén)麽分爲瞬時(shí)轉染和(hé)穩定轉染?
所謂的瞬時(shí)轉染和(hé)穩定轉染的主要區(qū)别其實就是其是否需要将外(wài)源核酸整合到(dào)宿主染色體上(shàng);
瞬時(shí)轉染：不用(yòng)将外(wài)源基因整合到(dào)宿主染色體中，通常這(zhè)個情況隻維持幾天，多用(yòng)于啓動子和(hé)其他(tā)調控元件的分析;
穩定轉染：将外(wài)源基因整合到(dào)宿主染色體中，也(yě)可以作(zuò)爲一種遊離體存在，通過一些(xiē)選擇标記，從(cóng)而得到(dào)穩定轉染的同源細胞系;
那麽，有哪些(xiē)轉染方法及其應用(yòng)呢(ne)?
1、磷酸鈣法。通過磷酸鈣DNA複合物吸附細胞膜，通過細胞内吞，實現(xiàn)轉染。但(dàn)是不适合用(yòng)于原代細胞，雖然操作(zuò)簡便，但(dàn)是重複性差;
2、電穿孔法。通過高(gāo)脈沖電壓破壞細胞膜電位，使得DNA通過膜小(xiǎo)孔進入。但(dàn)是容易造成細胞死亡，DNA和(hé)細胞用(yòng)量大(dà)，而且需要根據不同細胞的類型進行電穿孔實驗;
3、陽離子脂質體法。通過将帶正點的脂質體與核酸帶浮點的磷酸基團形成的複合物形成細胞内吞。這(zhè)個方法适用(yòng)性較廣，重複性好(hǎo)，但(dàn)是轉染的時(shí)候需要去除血清，且轉染後細胞類型變化較大(dà);
4、病毒介導法。通過侵染宿主的病毒将外(wài)源基因整合到(dào)染色體中。對(duì)于那些(xiē)難轉染的細胞來(lái)說，這(zhè)個方法非常合适，但(dàn)是所攜帶的基因不宜太大(dà)，且細胞需處于分裂期;
5、基因槍法。通過重金(jīn)屬吸附DNA，将其用(yòng)彈道(dào)射入細胞，使得其随着DNA在細胞内釋放(fàng)、表達。使用(yòng)範圍相對(duì)來(lái)說較廣;
