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在進行穩定細胞株構建時(shí)，爲了(le)将目的蛋白(bái)基因載入到(dào)宿主細胞中，我們都會(huì)選擇通過轉染的方式來(lái)實現(xiàn)。可以說，轉染的成功與否，直接關系到(dào)目的蛋白(bái)表達的結果。那麽，我們在進行穩定細胞株細胞轉染時(shí)，有沒有什(shén)麽辦法提升其轉染效率，起到(dào)事(shì)半功倍的效果呢(ne)?今天，普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊。
我們知(zhī)道(dào)，常用(yòng)的細胞轉染方法主要有三種，分别是生物轉染、物理(lǐ)轉染以及化學轉染。
生物轉染：其實就是通過病毒感染的方式，将目标蛋白(bái)DNA整合到(dào)宿主細胞中去;
物理(lǐ)轉染：通過電穿孔、細胞注射等方法，直接将目的蛋白(bái)DNA注入到(dào)宿主細胞中去(不過容易造成細胞死亡);
化學轉染：利用(yòng)陽離子與陰離子核酸結合的特性，使得兩者相互吸引，從(cóng)而實現(xiàn)轉染;
從(cóng)上(shàng)面的描述我們不難看(kàn)出，對(duì)于不同的轉染方法，其有着不同的優勢和(hé)劣勢，其轉染效率主要和(hé)如下(xià)幾個方面有關：
1、細胞活力。轉染成功率和(hé)細胞活性有着極大(dà)的關系，自(zì)然是活力越強，轉染的成功率就越高(gāo)，而且和(hé)細胞類型也(yě)有着一定的關系;
2、細胞融合度。融合度越高(gāo)，能(néng)夠在一定程度上(shàng)提升細胞轉染的接受程度;
3、核酸類型。簡單核酸類型轉染成功率更高(gāo)，反之越是複雜(zá)，成功率相對(duì)月低(dī);
4、轉染方法。對(duì)于不同類型的細胞選擇不同類型的轉染方法其成功率存在着極大(dà)的不同;
所以，想要提升穩定細胞株細胞轉染的目的，我們可以從(cóng)如下(xià)幾個方面入手：
1、選擇活性高(gāo)的細胞。盡量選擇那些(xiē)細胞活性高(gāo)的細胞，避免選擇活性低(dī)的細胞;
2、提升核酸純度。細胞轉染時(shí)需要保證目的DNA與RNA盡可能(néng)同質，确保每個步驟不收RNA酶的影響;
3、合适的細胞密度。需要控制好(hǎo)細胞密度，過高(gāo)或過低(dī)都會(huì)造成轉染效率變低(dī);
4、選擇合适的轉染方法。根據細胞的類型選擇合适的轉染方法，不要一直使用(yòng)單個轉染方法;
總的來(lái)說，我們在穩定細胞株細胞轉染時(shí)，需要結合細胞類型及其細胞活性來(lái)進行方法選擇，在轉染過程中需要注意到(dào)各類細節問題，隻有這(zhè)樣，才能(néng)更好(hǎo)地保證實驗的成功。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供穩定細胞株構建服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
