我們在穩定細胞株構建之前,需要優先判斷細胞是否滿足需求,其中最爲擔心的事(shì)情就是細胞污染。所以,學會(huì)判斷細胞污染與否,可以說是非常重要的。那麽,如何判斷細胞是否收到(dào)污染呢(ne)?今天,普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊。
1、肉眼觀察
我們完全可以拿起培養皿對(duì)着光查看(kàn)。一般可以從(cóng)渾濁情況、顔色變化等方面查看(kàn)。及時(shí)細胞密度再高(gāo),一般它的透明(míng)度都會(huì)很(hěn)高(gāo),輕輕晃動培養皿,查看(kàn)其渾濁程度。而顔色變化會(huì)受到(dào)酸堿度方面的影響,加了(le)酚紅(hóng)的培養基會(huì)随着酸堿度變色;
PS:不要直接通過聞的方式來(lái)判斷,很(hěn)多污染并不會(huì)使得其産生異味,也(yě)不要直接用(yòng)鼻子直接貼在瓶口聞;
2、顯微鏡觀察
通過從(cóng)低(dī)倍到(dào)高(gāo)倍的顯微鏡來(lái)查看(kàn)培養皿中細胞的具體情況。比如菌絲成長狀态、細胞内部、細胞損傷等情況;
3、制片觀察
如果通過如上(shàng)兩種方法無法确定是否發生污染,我們可以選擇通過如下(xià)方式來(lái)進行判斷:
制作(zuò)濕塗片。通過提取懸浮液,制成濕塗片或加入染色液在高(gāo)倍鏡下(xià)觀察;
細胞培養。将細胞在營養培養基或血瓊脂培養基上(shàng)培養3天,如果出現(xiàn)菌落,即代表細胞被污染;
總的來(lái)說,在進行穩定細胞株細胞培養時(shí),其是否受到(dào)污染完全可以通過如上(shàng)的方式來(lái)進行判斷。當然了(le),對(duì)于不同的細胞來(lái)說,其是否受到(dào)污染需要選擇其他(tā)方法。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供穩定細胞株構建服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。