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盤點常見的幾種穩定細胞株的構建方法

發表時(shí)間:2023-03-23 訪問次數:553

  前面我們和(hé)大(dà)家聊過有關穩定細胞株的構建原理(lǐ)及方法,如果沒有看(kàn)過,您可以點擊“穩轉細胞株的構建-構建原理(lǐ)及其構建方法盤點”進行查看(kàn)。但(dàn)是因爲篇幅所限,上(shàng)次沒能(néng)聊到(dào)有關穩定細胞株的構建方法。所以,今天普健生物在這(zhè)裏就和(hé)大(dà)家具體聊聊有關穩定細胞株構建的幾個常用(yòng)方法及其适用(yòng)範圍。

  穩定細胞株的構建方法主要有三種:

  1、單克隆環法。這(zhè)個方法多用(yòng)于針對(duì)哪些(xiē)整合率低(dī)卻有需要獲得單克隆株的方法。不過相比其他(tā)方法來(lái)說,這(zhè)個方法的工(gōng)作(zuò)量相對(duì)較小(xiǎo),隻需将轉染後的細胞按照一定的密度轉移到(dào)新的細胞皿中,然後采用(yòng)藥物進行篩選,最後挑選出合适的單克隆細胞株即可。但(dàn)是也(yě)正因爲操作(zuò)過于見到(dào),導緻其中容易出現(xiàn)所産生的細胞株不純,最終失去生長上(shàng)的優勢,導緻失去穩定細胞株;

  2、96孔單克隆稀釋法。這(zhè)個方法同樣适用(yòng)于整合率低(dī)的轉染或需要得到(dào)但(dàn)隔開(kāi)了(le)細胞株的實驗。從(cóng)理(lǐ)論上(shàng)來(lái)說,這(zhè)個方法能(néng)夠得到(dào)非常單一的單克隆抗體,同時(shí)可以篩選出懸浮穩定細胞株。隻不過因爲過程繁瑣,所以工(gōng)作(zuò)量相對(duì)要大(dà)一些(xiē);

  3、逆轉錄病毒混合克隆制備法。如果需要制備混合穩定株,這(zhè)個方法就顯得非常的合适了(le)。這(zhè)個不僅能(néng)讓我們在短時(shí)間内獲得穩定細胞株,而且能(néng)夠将所得細胞稀釋液轉移到(dào)新的器皿中,最終獲得單克隆細胞株。隻不過這(zhè)個方法需要進行逆轉錄,相對(duì)來(lái)說,技術更加複雜(zá),需要技術人員具備一定的實力才行;

  當然了(le),随着技術的發展,有更多的方法被設計(jì)出來(lái),能(néng)夠應對(duì)各種不同的使用(yòng)場景需求。所以,在後來(lái),我們完全可以選擇一種成本更低(dī)工(gōng)作(zuò)量更小(xiǎo)技術需求更低(dī)的方式。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供穩定細胞株構建服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。