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穩定細胞株是一種用(yòng)于大(dà)量且穩定表達蛋白(bái)的一種方式，不僅可以表達蛋白(bái)，而且還能(néng)進行相關藥物篩選以及基因表達，使用(yòng)範圍非常的廣泛。但(dàn)是，對(duì)于很(hěn)多企業來(lái)說，都不會(huì)選擇通過構建穩定細胞株來(lái)表達蛋白(bái)，因爲對(duì)于他(tā)們來(lái)說，穩定細胞株構建非常的困難，性價比相對(duì)較低(dī)。爲什(shén)麽穩定細胞株構建這(zhè)麽困難呢(ne)?下(xià)面，普健生物和(hé)大(dà)家具體聊聊。
我們知(zhī)道(dào)，外(wài)源基因的表達主要采用(yòng)兩種方式，一種是瞬時(shí)表達，另外(wài)一種是穩定表達。
瞬時(shí)表達：将外(wài)源DNA克隆到(dào)質粒中，而非将其整合到(dào)宿主細胞的染色體中。瞬時(shí)表達能(néng)夠迅速實現(xiàn)蛋白(bái)的表達，但(dàn)是也(yě)隻能(néng)持續幾天。瞬時(shí)表達的穩定性相對(duì)較差，而且在不同實驗中差異性較大(dà)，且無法長久;
穩定表達：直接将外(wài)源DNA整合到(dào)宿主細胞的染色體中，通過細胞篩選的方式，實現(xiàn)宿主細胞長期表達目的蛋白(bái)的方式;
但(dàn)是，問題出現(xiàn)了(le)。想要将外(wài)源基因整合到(dào)宿主細胞的染色體中相對(duì)困難，成功率非常的低(dī)，通常會(huì)發生随機整合，表達水(shuǐ)平會(huì)受到(dào)整合位置、周圍染色體原件等因素的影響。所以，如果我們想要獲得能(néng)夠進行穩定表達，則需要進行大(dà)量的篩選工(gōng)作(zuò)。
什(shén)麽情況下(xià)需要構建穩定細胞株?
1、對(duì)于那些(xiē)需要長期研究的目标細胞來(lái)說，可以通過構建穩定細胞株來(lái)實現(xiàn);
2、對(duì)于一些(xiē)半衰期極長，盡可以通過RNA幹擾卻無法表達的蛋白(bái)，隻有通過穩定細胞株來(lái)實現(xiàn);
3、對(duì)于那些(xiē)無法進行精确表達的細胞;
4、需要用(yòng)到(dào)細胞的;
穩定細胞株的構建要點有哪些(xiē)?
穩定細胞株構建是一個長期的過程，所以，從(cóng)質粒構建、病毒包裝、細胞感染以到(dào)細胞篩選等過程，都需要引起注意，因爲任何一個細節方面的錯誤都可能(néng)造成耗時(shí)大(dà)半年的項目付諸流水(shuǐ)。
穩定細胞株構建能(néng)夠在極大(dà)程度上(shàng)解決蛋白(bái)穩定表達的問題，對(duì)于一些(xiē)需要長期制備或者需要進行細胞的長期研究時(shí)，都可以通過穩定細胞株來(lái)解決。當然了(le)，對(duì)于穩定細胞株的構建，除了(le)需要相關技術支持外(wài)，還需要有精細且細節方面的操作(zuò)，隻有在各個方面做好(hǎo)了(le)，才能(néng)在更大(dà)程度上(shàng)保證其構建成功。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供穩定細胞株構建服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
