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前面我們和(hé)大(dà)家簡單介紹了(le)一下(xià)有關穩定細胞株篩選的步驟，讓大(dà)家對(duì)其有了(le)一定的了(le)解，那麽，是不是就可以直接開(kāi)始實驗了(le)呢(ne)?答(dá)案是否定的。在穩定細胞株篩選的過程中不僅有很(hěn)多細節操作(zuò)問題，還有很(hěn)多注意事(shì)項，稍不注意，就可能(néng)造成實驗的失敗。有鑒于此，普健生物今天在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家具體聊聊其注意事(shì)項問題。
1、篩選前的準備
篩選前我們需要确定藥物篩選的相關濃度。對(duì)于不同的細胞來(lái)說，其對(duì)藥物的敏感度是各不相同的，需要在細胞能(néng)夠承受的濃度範圍内，否則，很(hěn)容易造成細胞表達低(dī)甚至死亡的情況;
2、篩選過程中的注意事(shì)項
篩選時(shí)間：一般在轉染後48小(xiǎo)時(shí)後進行，而對(duì)于慢病毒來(lái)說加藥時(shí)間一般在72小(xiǎo)時(shí);
空(kōng)白(bái)對(duì)照：在加藥篩選時(shí)，需要提前設置好(hǎo)空(kōng)白(bái)對(duì)照，全程對(duì)比細胞的變化情況;
換液操作(zuò)：當細胞死亡達到(dào)一定的程度後，需要及時(shí)換液，以避免有害物質造成細胞的死亡;
3、克隆篩選過程中的注意事(shì)項
在進行單克隆篩選的時(shí)候，如果有熒光标記，則盡量選擇那些(xiē)帶有熒光較強的細胞;如果質粒不帶熒光标記，則隻能(néng)進行盲挑。
當然了(le)，無論是否帶有熒光标記，都需要對(duì)其進行驗證，而且盡量多挑幾個來(lái)進行克隆，以保證成功率;
當然了(le)，如上(shàng)所述也(yě)隻是注意事(shì)項中的一部分，對(duì)于不同實驗的不同需求來(lái)說，注意事(shì)項也(yě)是各種各樣的，比如基礎的溫度、PH值等等，這(zhè)些(xiē)都需要提前了(le)解好(hǎo)，而後根據相應的需求來(lái)配置相應的環境，這(zhè)樣才能(néng)有效提升實驗的成功率。武漢普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供穩定細胞株篩選服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
