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抗體提純在抗體應用(yòng)中是非常重要的一種手段，它能(néng)夠有效提升抗體的特性，降低(dī)所産抗體的副作(zuò)用(yòng)。所以，抗體純化操作(zuò)具備非常重大(dà)的意義。而每個企業在生産工(gōng)藝、技術水(shuǐ)平等方面存在極大(dà)的差異，所以純化方法也(yě)是各不相同。不過總體算(suàn)來(lái)主要有親和(hé)層析法、離子交換層析法、尺寸排阻色譜法以及殊死作(zuò)用(yòng)色譜法。今天，普健生物就在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家具體聊聊這(zhè)四種方法。
1、親和(hé)層析法
親和(hé)純化是一種通過可逆反應達到(dào)分離純化的技術，更适合用(yòng)來(lái)從(cóng)成分複雜(zá)并且雜(zá)質的含量要遠高(gāo)于目标蛋白(bái)的提純。先通過瓊脂糖與介質進行偶聯，使得其結合成爲具備相關特異的介質，然後通過配體進行選擇性地吸附，再通過平衡液清洗掉雜(zá)質，從(cóng)而提取到(dào)我們需要的目的抗體;
2、離子交換層析法
這(zhè)個方法的原理(lǐ)是利用(yòng)帶有電荷的溶質分子，通過其與帶有相反電荷的固定化離子交換基團之間發生可逆的相互作(zuò)用(yòng)。抗體本身就是一種蛋白(bái)，它可以在一定PH值的緩沖液中點解成離子，我們可以通過鄧店(diàn)點pl來(lái)進行離子交換層析實驗，提取出該層的離子後，再通過改變緩沖液的PH值分離出目标蛋白(bái)的目的;
3、尺寸排阻色譜法
這(zhè)個分離方法相對(duì)溫和(hé)，所選尺寸排阻的分離原理(lǐ)主要取決于分子其在溶液中的體積。當我們将溶液加入純化柱時(shí)，其分子會(huì)按照其尺寸進行從(cóng)大(dà)到(dào)小(xiǎo)地分離。分子小(xiǎo)的流動速度相對(duì)緩慢，大(dà)的分子會(huì)被快(kuài)速排出。所以，通過分子的大(dà)小(xiǎo)進行純化，就能(néng)夠進行有效且快(kuài)速地篩選;
4、疏水(shuǐ)作(zuò)用(yòng)層析法
疏水(shuǐ)作(zuò)用(yòng)層析法其實就是利用(yòng)鹽-水(shuǐ)體系中疏水(shuǐ)基團和(hé)層析介質的疏水(shuǐ)配基之間疏水(shuǐ)力的不同而進行分離的一種層析方法。這(zhè)種方法就是利用(yòng)變形後的蛋白(bái)暴露出的疏水(shuǐ)殘基，或者在高(gāo)鹽環境下(xià)暴露于分子表面的疏水(shuǐ)殘基，依次用(yòng)從(cóng)高(gāo)至低(dī)離子強度洗脫液将疏水(shuǐ)用(yòng)作(zuò)由弱至強的組分進行分離的方式;
或許又有人要問了(le)：這(zhè)四種蛋白(bái)純化方法，哪種方法更好(hǎo)呢(ne)?總的來(lái)說，這(zhè)四種方法各有優勢，當然也(yě)各有不足之處，需要結合抗體的來(lái)源、時(shí)間需求、成本預算(suàn)以及抗體用(yòng)途等一系列的需求進行考慮，選擇一種最适合的蛋白(bái)純化方式。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)純化服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。
