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噬菌體展示技術的核心技術點及其優勢體現(xiàn)

發表時(shí)間:2022-12-09 訪問次數:776

  單克隆抗體作(zuò)爲現(xiàn)階段效果最佳、使用(yòng)範圍最廣的一款藥劑,在臨床試驗中起到(dào)了(le)良好(hǎo)的效果。但(dàn)是,現(xiàn)階段常用(yòng)的一些(xiē)抗體制備方式中,常常會(huì)出現(xiàn)異源反應的情況。不僅會(huì)造成效果達不到(dào)預期,更有甚者會(huì)造成患者的不良反應。作(zuò)爲解決異源性的方法之一,全人源化抗體起到(dào)了(le)至關重要的作(zuò)用(yòng)。噬菌體展示技術作(zuò)爲全人源抗體制備的主要方式,在極大(dà)程度上(shàng)解決了(le)這(zhè)個問題。

  那麽,什(shén)麽是噬菌體展示技術呢(ne)?

  噬菌體展示技術其實就是一種高(gāo)效的基因表達篩選技術,它通過将外(wài)源蛋白(bái)表達基因剪切到(dào)噬菌體的外(wài)殼基因中,在噬菌體表達外(wài)殼蛋白(bái)的時(shí)候,會(huì)同時(shí)表達目的蛋白(bái)。當然了(le),因爲一些(xiē)外(wài)殼蛋白(bái)可能(néng)會(huì)影響到(dào)目的蛋白(bái)的效果,我們還可以通過分離和(hé)篩選純化等一系列的操作(zuò)進一步提純目的蛋白(bái)。

  目前噬菌體展示技術已經非常的成熟了(le),在抗原表位分析、單克隆抗體制備、抗體人源化、藥物篩選等方面有着廣泛的使用(yòng)。

  噬菌體展示技術的技術難點體現(xiàn)在哪些(xiē)方面?

  雖然說噬菌體展示技術存在着如此衆多的優點,但(dàn)是,也(yě)并不是說随便一家公司就可以做的,不僅僅是因爲技術方面的原因,成本投入也(yě)是很(hěn)大(dà)一部分原因。想要噬菌體展示成功,有兩大(dà)難點:噬菌體建庫和(hé)噬菌體篩選。

  1、噬菌體建庫

  将從(cóng)B細胞内提取的抗體輕重鏈抗體片段群與噬菌體外(wài)殼蛋白(bái)融合,并進行融合表達,使其表達與噬菌體外(wài)殼表面,從(cóng)而形成噬菌體展示抗體庫。主要分爲三種:scFv庫、Fab庫、VHH庫;

  2、噬菌體篩選

  噬菌體篩選是其中的關鍵環節,主要包括淘篩和(hé)鑒定兩個步驟。

  一般在進行篩選的時(shí)候,我們需要進行報(bào)備抗原及對(duì)照,通過3-4輪的篩選,選擇出合适的抗體。而後再通過多克隆ELISA判斷特異富集,而後通過單克隆ELISA、陽性克隆VALIDATED ELISA來(lái)确定克隆測序,最後通過重組抗體表達的方式來(lái)制備所需蛋白(bái);

  噬菌體展示技術的優勢體現(xiàn)在哪些(xiē)方面?

  和(hé)傳統蛋白(bái)制備技術來(lái)說,噬菌體展示技術制備的蛋白(bái)能(néng)夠滿足大(dà)批量的生産,同時(shí)也(yě)可以通過基因技術,提升抗體在親和(hé)力、免疫原性等方面的能(néng)力,而且篩選周期短、操作(zuò)簡單、應用(yòng)範圍廣等優勢。

  總的來(lái)說,噬菌體展示技術在極大(dà)程度上(shàng)滿足的我們在抗體制備方面的需求。無論是單克隆抗體制備,還是抗體人源化方面,都存在着傳統抗體制備方式所不具備的優勢。但(dàn)是也(yě)有着不住之處,比如需要以一定的技術實力去攻克建庫以及篩選方面的難題,同時(shí)還需要具備相應的經濟實力。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供噬菌體展示服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。