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關于昆蟲杆狀病毒表達系統你(nǐ)了(le)解多少?

發表時(shí)間:2022-12-16 訪問次數:497

  蛋白(bái)表達中我們常用(yòng)的方法主要有四種:大(dà)腸杆菌表達系統、杆狀病毒昆蟲表達系統、酵母表達系統以及哺乳動物表達系統。這(zhè)四種表達方式各具特點,當然也(yě)各有不足之處,結合我們的需求,從(cóng)中選擇最适合我們的表達方式。今天,普健生物在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家具體聊聊昆蟲杆狀病毒表達系統。

  相對(duì)其他(tā)三種表達系統拉說,杆狀病毒昆蟲表達系統具備安全性好(hǎo)、重組蛋白(bái)表達量高(gāo)、蛋白(bái)修飾後翻譯完整且容易實現(xiàn)大(dà)規模生産,使得其在蛋白(bái)表達行業有着廣泛的應用(yòng)。昆蟲杆狀病毒表達系統主要采用(yòng)昆蟲杆狀病毒爲載體,同時(shí)采用(yòng)昆蟲細胞爲載體來(lái)進行蛋白(bái)表達。

  但(dàn)是昆蟲杆狀病毒表達相比其他(tā)表達系統來(lái)說,蛋白(bái)表達量要低(dī)一些(xiē),那麽,是否有其他(tā)辦法可以提升其表達水(shuǐ)平呢(ne)?答(dá)案是肯定的。

  方法一:抑制蛋白(bái)降解酶的産生

  在采用(yòng)病毒進行蛋白(bái)表達時(shí),病毒本身就會(huì)産生蛋白(bái)酶,它會(huì)對(duì)重組蛋白(bái)進行降解。這(zhè)個時(shí)候,我們就需要對(duì)其進行一些(xiē)基因方面的調整個,或者通過添加一些(xiē)緩沖液,降低(dī)其降解速度;

  方法二:調控目的基因轉錄

  通過實驗我們了(le)解到(dào),多角體基因的下(xià)遊序列一般都會(huì)對(duì)下(xià)遊序列的外(wài)源基因表達産生影響。如果改變外(wài)源基因的終止密碼子,則會(huì)對(duì)目的基因的表達産生影響,所以,我們在進行目的基因表達的時(shí)候,可以增強其啓動因子;

  方法三:優化啓動子

  在不同的啓動子控制下(xià),蛋白(bái)表達的水(shuǐ)平存在着很(hěn)大(dà)的差異。一般來(lái)說,P10啓動子和(hé)堿性啓動子的效果較好(hǎo),其他(tā)啓動子或多或少都存在着一些(xiē)不足之處。所以,我們在進行蛋白(bái)表達的時(shí)候,可以優先考慮着兩種啓動子;

  方法四:使用(yòng)活體昆蟲表達蛋白(bái)

  和(hé)昆蟲培養不同,采用(yòng)幼蟲或蛹表達蛋白(bái)的水(shuǐ)平能(néng)夠顯著提升,而且在很(hěn)多實驗中已經證明(míng),采用(yòng)幼蟲能(néng)夠高(gāo)效提升許多真核生物蛋白(bái)的制備;

  當然了(le),昆蟲杆狀病毒表達系統也(yě)存在着一些(xiē)不足之處,但(dàn)是在各個領域内卻也(yě)占據這(zhè)重要的地位。而且随着這(zhè)一表達系統研究的不斷深入,其調理(lǐ)機制也(yě)變得愈發的清晰,相信在未來(lái),其使用(yòng)将會(huì)變得更加的廣泛。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)表達服務,四大(dà)表達方式,根據您的需求來(lái)選擇。