首頁 / 資料下(xià)載 / 知(zhī)識百科

杆狀病毒昆蟲表達系統的設計(jì)概念及其構建方法

發表時(shí)間:2023-05-26 訪問次數:315

  杆狀病毒昆蟲表達系統是現(xiàn)如今使用(yòng)最爲廣泛的表達系統之一,其不僅能(néng)有效提升蛋白(bái)表達效率,而且安全性好(hǎo),具備良好(hǎo)的生物活性。而且因爲其通過感染昆蟲細胞或幼蟲來(lái)表達外(wài)源蛋白(bái),所以不會(huì)對(duì)哺乳動物産生任何緻病性,因此,自(zì)誕生以來(lái),就得到(dào)了(le)廣泛的應用(yòng)。那麽,杆狀病毒昆蟲表達系統的具體涉及理(lǐ)念及其構建方法是怎樣的呢(ne)?下(xià)面,普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊。

  杆狀病毒昆蟲表達系統的設計(jì)理(lǐ)念是怎樣的?

  其實和(hé)哺乳動物表達系統一樣,杆狀病毒昆蟲表達系統也(yě)是通過将外(wài)源基因通過剪切、對(duì)接等方式,将外(wài)源基因加入到(dào)昆蟲細胞中,而後讓目的蛋白(bái)随着昆蟲細胞的表達而表達。之後再通過蛋白(bái)析出、純化等一系列的操作(zuò),最終獲得我們所需蛋白(bái)的方式。

  杆狀病毒昆蟲表達系統的構建方法是怎樣的?

  和(hé)哺乳動物表達系統不同,杆狀病毒昆蟲表達系統主要分爲兩種:在昆蟲細胞内重組和(hé)在昆蟲細胞外(wài)重組。

  在昆蟲細胞内重組:

  最早期常用(yòng)這(zhè)個方法,通過将未加修飾的野生病毒進行重組,後來(lái)發展成采用(yòng)線性化的病毒DNA替代,将其與轉染載體進行昆蟲細胞共轉染時(shí),隻要不發生同源重組,那麽,重組率則會(huì)高(gāo)達100%;

  而後,大(dà)家對(duì)這(zhè)個方法進行了(le)改良,比如直接克隆等方法,不僅能(néng)避免大(dà)腸杆菌内的重組,也(yě)能(néng)有效加速重組的過程。

  在昆蟲細胞外(wài)重組:

  通過将外(wài)源基因重組到(dào)病毒基因中去 ,而且隻用(yòng)重組杆狀病毒DNA去轉染昆蟲細胞。當然了(le),随着技術的發展,有科協家利用(yòng)噬菌體編碼重組酶,讓其提高(gāo)重組效率,而後在通過染色等手段進行重組體的鑒定等;

  總的來(lái)說,杆狀病毒昆蟲表達系統在一定程度上(shàng)解決了(le)其他(tā)表達系統的不足之處,無論在方法還是在制備成本上(shàng)都有着一定的優勢,但(dàn)是也(yě)有着一定的不同。不過,我們相信,随着技術的不斷發展,在後期其一定會(huì)得到(dào)更好(hǎo)的利用(yòng)。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供蛋白(bái)表達服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。