30年來(lái),雜(zá)交瘤抗體制備依然是實驗室中單克隆抗體制備的主要技術,在免疫組化以及各類細胞生物學中發揮着重大(dà)的作(zuò)用(yòng)。但(dàn)是随着過去10年内基因重組技術的飛(fēi)速發展,無論是組合庫還是抗體工(gōng)程,尤其是在高(gāo)端抗體制備領域都有着重要的作(zuò)用(yòng)。那麽,對(duì)于抗體制備的幾個過程您了(le)解嗎?今天普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊。
1、免疫動物獲得抗體。這(zhè)是一個相對(duì)傳統的過程,它通過将免疫原注射到(dào)宿主(小(xiǎo)鼠、大(dà)鼠、兔等動物)體内,以此來(lái)刺激動物體内B細胞發生應答(dá)反應,從(cóng)而分泌出對(duì)應的抗體。而後,我們再通過收集動物血清,而後通過分離純化等過程,獲得多克隆抗體。
優點:成本低(dī),技術要求低(dī),生産周期短;
缺點:需要使用(yòng)大(dà)量動物,而且不容易實現(xiàn)大(dà)規模生産;
2、雜(zá)交瘤技術。通過價格B淋巴細胞與能(néng)夠無限增殖的骨髓瘤細胞結合,形成一個大(dà)細胞。這(zhè)個細胞不僅能(néng)夠制備特異性抗體,而且能(néng)夠無限增殖能(néng)力。就工(gōng)藝而言,先通過向動物體内注射免疫原,而後收集脾髒B細胞,再通過體外(wài)融合技術對(duì)其進行融合。之後在對(duì)細胞進行體外(wài)篩選、培養,收集并純化上(shàng)清液獲得抗體。
優點:特異性高(gāo)、适合大(dà)批量生産;
缺點:操作(zuò)步驟繁瑣、鼠源性較高(gāo);
3、基因工(gōng)程技術。通過體外(wài)重組技術,将抗體片段插入到(dào)特定的載體中,而後對(duì)其進行擴增、培養,而後讓對(duì)片段在體外(wài)進行轉錄、翻譯,最終得到(dào)我們所需的抗體。
優點:加速生産,親和(hé)力高(gāo),人源化更便捷,易于大(dà)量生産;
缺點:技術繁瑣,成本投入更高(gāo);
當然了(le),随着技術的發展,很(hěn)多新型的技術已經被發明(míng)出來(lái)了(le),但(dàn)是因爲其僅适合于一些(xiē)小(xiǎo)衆的實驗,所以并未流行起來(lái)。但(dàn)是,相信在不僅的将來(lái),更多的技術将會(huì)被發明(míng)并規模化使用(yòng)出來(lái)。普健生物專業爲您提供抗體制備服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。
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