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抗原制備時(shí)常用(yòng)的方法、條件及制備方式

發表時(shí)間:2024-03-20 訪問次數:254

  無論是單克隆抗體制備還是多克隆抗體制備,抗原的設計(jì)都是最爲重要的一個過程,隻有設計(jì)出合理(lǐ)的抗原,才能(néng)更好(hǎo)地刺激機體産生抗體。那麽,抗原制備需要具備哪些(xiē)條件?具體制備方法有哪些(xiē)?以及制備過程中的注意事(shì)項有哪些(xiē)?下(xià)面,普健生物和(hé)大(dà)家具體聊聊。

單克隆抗體和(hé)多克隆抗體

  一個良好(hǎo)的抗原制備條件有哪些(xiē)?

  1、分子足夠大(dà)。對(duì)于多肽或蛋白(bái)類抗原來(lái)說,其抗原決定簇直接關注到(dào)其抗體的産生。但(dàn)是,對(duì)于抗原決定簇來(lái)說,其通常由6-8個氨基酸殘基組成,所以,隻有分子量足夠大(dà)的抗體才能(néng)承載得上(shàng);

  2、外(wài)源性強。所選抗體盡量和(hé)免疫機體異源性高(gāo),這(zhè)樣才能(néng)更好(hǎo)的刺激機體産生抗體;

  3、結構更複雜(zá)。一般來(lái)說,簡單的物質不具備免疫原性,隻有結構足夠複雜(zá),才能(néng)在更大(dà)程度上(shàng)刺激免疫反應的發生;

  4、可降解性好(hǎo)。作(zuò)爲抗原,必須是可降解的,否則,很(hěn)容易對(duì)機體造成不可挽回的影響;

  常用(yòng)的抗原制備方法有哪些(xiē)?

  1、高(gāo)純度的天然蛋白(bái)。一般來(lái)說,蛋白(bái)存在翻譯後修飾,其結構複雜(zá)度也(yě)是非常高(gāo)的,所以,天然蛋白(bái)就是很(hěn)好(hǎo)的抗原,隻是需要做好(hǎo)純化操作(zuò);

  2、高(gāo)純度的重組蛋白(bái)。天然蛋白(bái)既然可以用(yòng)作(zuò)抗原,重組蛋白(bái)自(zì)然也(yě)可以。而且生産過程更容易掌控,也(yě)可以根據需求進行設計(jì),當然了(le),純化依然是必不可少的一個方面;

  3、人工(gōng)合成的多肽。合成的多肽也(yě)能(néng)在 一定程度上(shàng)影響到(dào)機體,使得其産生免疫反應。但(dàn)是,一般來(lái)說多肽的分子量都較小(xiǎo),需要将多肽連到(dào)一個較大(dà)載體來(lái)增加其免疫原性;

  抗原設計(jì)時(shí)需要注意的問題有哪些(xiē)?

  1、序列的外(wài)源性。設計(jì)出的序列不能(néng)和(hé)動物體内的序列相同,否則很(hěn)難産生免疫反應;

  2、蛋白(bái)的親疏水(shuǐ)性。對(duì)于蛋白(bái)來(lái)說,親水(shuǐ)端一般顯露在外(wài),而疏水(shuǐ)端則隐藏在内部,所以,設計(jì)的片段盡量選擇親水(shuǐ);

  3、N端與C端的選擇。對(duì)于抗原來(lái)說,末端肽段效果要優于中間段肽段;

  4、多肽的長度。一般來(lái)說,一個抗原決定簇由6-8個氨基酸組成,所以,多肽的長度不能(néng)少于6個氨基酸;

  無論對(duì)于抗原還是抗體來(lái)說,都需要保持其高(gāo)純度。純度越高(gāo),其可能(néng)産生的非目的性免疫反應就會(huì)越小(xiǎo),目的蛋白(bái)的比重就會(huì)越高(gāo)。當然了(le),作(zuò)爲抗原,不能(néng)有太大(dà)的毒性,既要讓機體産生免疫原性,又要不對(duì)機體造成太大(dà)影響。普健生物專業爲廣大(dà)用(yòng)戶提供抗原制備服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。