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有關鼠單克隆抗體制備的詳細過程

發表時(shí)間:2022-09-28 訪問次數:2617

  自(zì)從(cóng)雜(zá)交瘤細胞技術被建立以來(lái),這(zhè)種既能(néng)分泌抗體,又能(néng)無限增殖的雜(zá)交融合細胞技術就得到(dào)了(le)廣泛的使用(yòng)。它能(néng)大(dà)量産生同一種抗體,而且是針對(duì)同一抗原的高(gāo)度同質化的抗體,這(zhè)種抗體我們稱之爲單克隆抗體(單抗,monoclonal antibody)。下(xià)面,普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊有關鼠單克隆抗體制備的詳細過程。

  基本過程如下(xià):

  1、将抗原注入小(xiǎo)鼠體内;

  2、培養小(xiǎo)鼠一定時(shí)間;

  3、獲取小(xiǎo)鼠脾髒,獲得脾細胞;

  4、通過雜(zá)交瘤技術,将其B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,獲得雜(zá)交瘤細胞(不僅具備B細胞特性,同時(shí)可以無限增殖);

  5、篩選出優質的雜(zá)交瘤細胞;

  6、對(duì)篩選出來(lái)的雜(zá)交瘤細胞進行鑒定和(hé)克隆(也(yě)就是我們常說的雜(zá)交瘤細胞株);

  目前雜(zá)交瘤技術的使用(yòng)變得越發的廣泛,還有更多的潛力等待我們開(kāi)發。相對(duì)于抗血清來(lái)說,能(néng)減少大(dà)量動物和(hé)費用(yòng)。而且其純度高(gāo),均一性好(hǎo),更适合藥物生産和(hé)臨床使用(yòng)。

  獲得雜(zá)交瘤細胞株後,我們通常會(huì)通過如下(xià)兩個方法來(lái)産生單克隆抗體。

  1、小(xiǎo)鼠腹水(shuǐ)。将雜(zá)交瘤細胞接種到(dào)小(xiǎo)鼠腹腔内,在獲得腹水(shuǐ)的同時(shí),可以通過純化獲得抗體。這(zhè)個方法操作(zuò)相對(duì)簡單,花(huā)費較少,重複性高(gāo),但(dàn)是傷害動物,如果需要實現(xiàn)大(dà)規模生産,則需要使用(yòng)到(dào)大(dà)量的小(xiǎo)鼠;

  2、細胞培養。直接培養雜(zá)交瘤,提取其上(shàng)清液中的抗體。這(zhè)個方法适合大(dà)規模生産,隻是獲得的抗體所包含的雜(zá)質較多,可能(néng)會(huì)産生一些(xiē)影響到(dào)當體純度的雜(zá)蛋白(bái);

  如上(shàng),便是有關鼠單克隆抗體生産的全部過程,可以說,如上(shàng)的方法都存在着一定的局限性,純度高(gāo)的方法對(duì)動物傷害較大(dà),大(dà)規模生産的方法則含雜(zá)質較多。所以,我們在日常實驗中,需要結合自(zì)己的實際來(lái)選擇合适的方法,以滿足我們單克隆抗體生産的需求。更多鼠單抗生産的知(zhī)識,敬請(qǐng)關注普健生物。