如何做好(hǎo)穩定細胞株的篩選工(gōng)作(zuò)?

　　穩定細胞株廣泛應用(yòng)于重組蛋白(bái)、抗體生産、檢測分析等領域，因爲其表達的蛋白(bái)穩定性好(hǎo)、批次間的差異小(xiǎo)，所以，被廣泛使用(yòng)與醫(yī)學領域。我們知(zhī)道(dào)，在穩轉株構建的過程中，會(huì)涉及到(dào)一個篩選的過程，今天我們就和(hé)大(dà)家具體聊聊有關穩定細胞株篩選方面的工(gōng)作(zuò)。

　　如何進行穩定細胞株的篩選呢(ne)?普健生物今天在這(zhè)裏和(hé)大(dà)家分享兩種篩選方法。

　　方法一：通過将質粒整合到(dào)染色體上(shàng)後，通過單克隆篩選穩定細胞株。

　　1、以10天内細胞全部死亡的抗生素濃度來(lái)作(zuò)爲基準濃度;

　　2、細胞接種，轉染實驗前接種的細胞，轉染細胞密度達到(dào)60%-80%的細胞;

　　3、轉染;

　　4、篩選具備抗性的細胞，并鑒定所篩選的結果;

　　方法二：利用(yòng)逆轉錄病毒篩選穩定細胞株。

　　1、人源化的抗體基因轉接到(dào)慢病毒載體上(shàng);

　　2、使用(yòng)包裝細胞包裝病毒;

　　3、用(yòng)病毒去轉染目的細胞;

　　4、篩選出合适的細胞株;

　　其實大(dà)家也(yě)不難看(kàn)出，穩定細胞株篩選的過程其實都大(dà)同小(xiǎo)異，大(dà)體上(shàng)的程序基本相同，隻是在細節方面有着一定的區(qū)别，這(zhè)也(yě)是細胞株構建成功與否的原因所在。普健生物專業爲您構建穩定細胞株服務，如果您有相關需求，歡迎來(lái)電咨詢。