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穩轉細胞株的構建-構建原理(lǐ)及其構建方法盤點

發表時(shí)間:2023-03-22 訪問次數:575

  随着生物技術的發展,越來(lái)越多的方法開(kāi)始在抗體藥物生産中投入使用(yòng)。抗體藥物開(kāi)發是一個非常繁瑣的過程,而穩定細胞株則幾乎适用(yòng)于抗體藥物開(kāi)發的各個階段。無論是重組蛋白(bái)、抗體生産,還是檢測分析和(hé)功能(néng)性研究,幾乎都适合使用(yòng)。今天,普健生物就和(hé)大(dà)家具體聊聊有關穩定細胞株構建的原理(lǐ)及方法。

  其實很(hěn)多人禁不住地想問:什(shén)麽是穩定細胞株?它到(dào)底是個什(shén)麽操作(zuò)?

  所謂的穩定細胞株,其實就是能(néng)夠實現(xiàn)穩定表達的細胞株,基于某一細胞系構建的持續性過表達或幹擾特定基因的細胞系。我們知(zhī)道(dào)一般的細胞是無法實現(xiàn)持續表達的,而穩定細胞株則能(néng)夠通過一定的方法讓細胞實現(xiàn)穩定持續性表達;

  穩定細胞株的構建原理(lǐ)是什(shén)麽?

  通過基因技術将外(wài)源DNA或RNA克隆到(dào)具備某種抗性的載體上(shàng),重組的載體則會(huì)整合到(dào)染色體中,并随着細胞的分裂穩定傳導下(xià)去,而後再對(duì)細胞進行篩選,這(zhè)樣就能(néng)獲得我們所需能(néng)夠實現(xiàn)穩定表達的細胞株;

  爲什(shén)麽要用(yòng)到(dào)穩定細胞系?

  1、使用(yòng)穩定細胞系能(néng)夠有效降低(dī)頻繁轉染的成本;

  2、可以更好(hǎo)地實現(xiàn)基因幹擾表達的結果;

  3、避免因爲人爲原因所造成的結果不準确的情況;

  什(shén)麽時(shí)候需要用(yòng)到(dào)穩定細胞系?

  1、外(wài)源基因需要實現(xiàn)長期穩定表達時(shí);

  2、需要使用(yòng)到(dào)誘導表達系統時(shí);

  3、目的基因過表達或需要跟然時(shí)空(kōng)特異性時(shí);

  4、細胞或病毒無法實現(xiàn)高(gāo)傳導效率時(shí);

  5、需要向動物體内注射外(wài)源表達片段細胞時(shí);

  6、細胞個體存在差異時(shí);

  7、需要将外(wài)源片段插入基因組中時(shí);

  而目前常用(yòng)的穩定細胞構建方法主要有三種:單克隆環法、96孔單克隆稀釋法、逆轉錄病毒混合克隆制備法,這(zhè)些(xiē)方法我們将在後期和(hé)大(dà)家具體介紹,本次就不贅述了(le)。

  總的來(lái)說,穩定細胞株的構建能(néng)夠在極大(dà)程度上(shàng)避免一些(xiē)重組蛋白(bái)所産生的無法表達的情況,以及應對(duì)一些(xiē)細胞無法實現(xiàn)高(gāo)表達的情況。當然了(le),穩定細胞株也(yě)非萬能(néng)的,在很(hěn)多情況下(xià)反倒會(huì)造成相關資源的損耗,所以,需要結合實際情況來(lái)進行選擇。普健生物專業爲您提供穩定細胞株構建服務,如果您有相關需求,歡迎來(lái)電咨詢。